想做制備液相，但無從下手，
拿到了小試結果，可不知道怎么放大，
制備結果不符合預期要求卻不知道原因，
這是為什么呢？
那么，我們一起來往下看吧……
大家都知道，制備型（Prep）色譜是以分離、富集和純化為目的，以供進一步使用。
通常為了進行有效的制備型分離，需要了解如下信息：
1.組成
樣品大概有多少個組分；
分離的目標組分有哪些（一定要明確）；
2.純度
目標組分的純度要求是多少；
對于制備型分離，對產品通常都有一定的純度要求，也就是說并不是所有的分離都要求產品純度達到100%，目標組分只要能達到我們具體的科研或是生產的純度要求就可以了。如微量的天然產物將其富集到大約70%的含量就可以進行初步鑒定；供核磁及紅外測試的樣品純度只要達到95%左右就可以達到要求；做定量分析用的標準品其含量至少要在99%以上；而一些生物活性物和一些生物活性物質只需要除去其中的有害成分，并且它們的純度并不用含量來表示，而是用活力這個概念。只有了解產品純度的要求，我們才能在制備型分離中，建立起合適的方法。
3.復雜性
干擾物質有哪些（盡可能了解，便于復雜樣品的前處理）；
4.性質
樣品的物理或化學性質（化學結構、溶解性、酸堿性、化合物的檢測方式）；
目標組分的物理或化學性質（同上）；
對于目標組分，如果是未知化合物，則需要了解大致有哪些特征的官能團，如羥基、羧基、氨基、苯環、含氮雜環等，最終的目的都是了解化合物的極性大小（logP值）和化合物的酸堿性（pKa值）。這兩個參數往往決定了在制備液相色譜方法開發中固定相和流動相的類型。
5.價值
原料是否易得、是否昂貴；
所分離的目標物價值又如何？
只有掌握了樣品的這些初步情況，才能使我們后面分離方法的建立有的放矢，選擇合適的固定相和流動相，挑選一只分析柱（如4.6mm*250的分析型柱子，使用10μm的制備級填料）進行方法摸索，并進行優化。
優化步驟可以簡單的歸納如下：
選擇最佳的高效液相色譜分離條件
在分析型的設備條件下
摸索制備型分離方法
放大到制備型的規模上
進行制備型分離
收集餾分
在分析型的液相色譜儀器上
檢測產品純度，
如果不符合要求，重新在分析型
液相色譜儀器上改進分離條件
合并相同組分
如果有需要的話，
可以再進一步提純產品
收集目標物
看到這，有的小伙伴可能有疑問了，為什么不直接在制備柱上去摸索呢？因為直接在制備柱上摸索條件，規模變大，如果方法條件不合適，沒有獲得希望的純度，會造成樣品和試劑的多種浪費，時間長了還容易造成制備柱的損壞。需要注意的是，依據分析柱上摸索的方法，最好選擇與分析柱相同品牌的填料的制備柱，以免摸索好的方法在制備柱上無法重現。
下圖為幾款月旭科技用于小試和中試的WelPackerDAC動態軸向壓縮柱產品。
不同內徑的制備柱都有自己載樣量范圍。如果上樣量過小，則洗脫效率降低；如果上樣量過高，則樣品在柱內過載，可能與雜質無法得到有效分離即被直接洗脫流出。這里需要說明一點的是，由于大多數的制備型色譜都是在適量過載的情況下工作的，而在該條件下色譜柱的柱效是呈指數下降的，對于制備色譜柱過分追求小粒徑填料是得不償失的，如5μm粒徑填料的成本比10μm粒徑填料高好多。
制備色譜柱的使用壽命主要取決于柱子的質量、樣品的性質和干凈程度。對于高價值的DAC來講，延長柱子壽命是很重要的。一般來說，DAC需要配套制備型在線過濾器防止顆粒物堵塞制備柱。
下圖為幾款月旭科技常見的制備型在線過濾器。
月旭科技提供專業的方法開發，提供量身定制整體制備色譜解決方案，以滿足復雜的探索和業務需求，幫助您發現新方法來克服操作和數據挑戰。
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