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液相譜圖出現裂峰怎么辦?

閱讀:1397      發布時間:2023-2-10
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在樣品檢測中,經常會出現一個純度較高的單成分對照品,進樣后卻出現分裂峰,甚至直接呈兩個峰的狀態。除了色譜柱被污染,色譜柱損壞等原因外,還有可能是檢測方法不當,比如pH值不合適,離子試劑濃度不當等原因。



實例一(離子對試劑濃度不當):


離子對試劑與化合物結合后使保留時間得以延長,但如果離子對試劑的使用量不當,化合物與離子對結合不完整,導致待測成分部分結合,也會呈現兩種狀態,導致峰分裂。

微信截圖_20230210162527.png

色譜柱:Ultimate® LP-C18 4.6×300mm,5μm

流動相:1g/L庚烷磺酸鈉(pH2.0):甲醇=90:10

微信截圖_20230210162539.png

流動相:2g/L庚烷磺酸鈉(pH2.0):甲醇=80:20

微信截圖_20230210162613.png

結論:離子對作為比較特殊的分離模式,其間往往作用力是多方作用,增加離子對能夠是兩個改善峰形,改善分裂峰,同時也可能需要微調其他條件來輔助。



實例二(pH值不當):



酸堿性化合物在不同pH下呈現不同的狀態,不合適的pH條件下化合物出現分子態和離子態共同存在的情況,導致峰分裂甚至直接呈兩個峰。

微信截圖_20230210162706.png

色譜柱:Ultimate® LP-C18 4.6×250mm,5μm

流動相:10mmol/L磷酸二氫鉀:甲醇=80:20

微信截圖_20230210162718.png

結論:調整流動相的pH后,使化合物在特定環境中保持穩定且單一的狀態,從而不呈現分裂峰。

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