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穩定的pH環境在HPLC檢測中的重要性

閱讀:1251      發布時間:2022-9-15
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在液相色譜中,經常會在流動相中加入緩沖溶液,其目的之一就是使整個HPLC系充處理一個穩定的化學環境,從而使檢測具有更好的重現性。若系統的pH不夠穩定,則會出現保留時間漂移,多次檢測保留時間不能重現,多組分出峰順序,峰組成不一致等等的各種問題。

特別是酸堿性成分的檢測,pH值對其保留與峰型都有很大的影響,因此,這些成分檢測時,HPLC系統的pH穩定性就非常的重要,需在流動相中加入相應的緩沖鹽來保持系統的穩定性。例如我們平常使用的鹽例如磷酸在1.5-3.5的pH范圍內,有比較好的緩沖能力。

實例:

某成分原流動相僅使用冰醋酸調節pH值,但并未加緩沖鹽體系,因HPLC系統的pH值不夠穩定,而導致的樣品檢測時某一個峰產生漂移,多次實驗,結果不能重現的問題。


圖1:流動相中沒有緩沖溶液,系統pH值不穩定

微信截圖_20220915132401.png

在這個實例中,原流動相沒有緩沖能力,pH值不穩定,將流動相替換成鹽后,能提供穩定的緩沖能力,使各個物質到達較滿意的分離,并具有比較好的重現性。

圖2:在流動相中加入緩沖鹽,使系統pH保持穩定

微信截圖_20220915132407.png



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