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去內毒素親和填料常見問題解答

閱讀:1236      發布時間:2021-11-18
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去內毒素親和填料常見問題解答


內毒素是一種常見的蛋白污染物,它的存在使得蛋白的活性研究變得十分復雜,并且內毒素是一種對人類有害的化學物質,它能引起發熱、微循環障礙、內毒素休克及播散性血管內凝血等一系列不良癥狀,因此,檢測和去除蛋白中的內毒素有著十分重要的意義。

月旭Endotoxin rem Tanrose 4FF 內毒素親和填料以自制的瓊脂糖凝膠為基質、多占菌素B為配基,用于去除生物源蛋白類產品(包括多肽、抗體、多糖等)中的內毒素,但多占菌素B只對部分內毒素有抑制作用,而不能抑制所有內毒素。


常見問題及解決方案


1. 內毒素去除效率低,應當怎么做?

①可能原因:樣品pH值不在內毒素結合范圍。

解決方法:用0.1M NaOH或0.1M HCl調節pH至7-8。

②可能原因:樣品與填料接觸時間短。

解決方法:降低流速,增加樣品接觸時間。

③可能原因:檢測系統被內毒素污染。

解決方法:確保所有試驗用品均為無熱源產品。

④可能原因:內毒素與目的蛋白結合較強。

解決方法:優化樣品pH,使樣品能夠與內毒素分離。

2. 樣品被污染,應當怎么做?

可能原因:該填料純化過其他樣品。

解決方法:增加接觸時間;不要用使用過的填料來去除不同樣品的內毒素。

3.樣品回收率低,應當怎么做?

①可能原因:樣品非特異性吸附在填料上。

解決方法:增加樣品和平衡液中的NaCl濃度。

②可能原因:目的蛋白與內毒素結合一起被去除。

解決方法:優化樣品pH,使樣品與內毒素分離。


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