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2020版《中國藥典》一部中藥材中h曲霉毒素的檢測

閱讀:1671      發布時間:2020-8-12
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h曲霉毒素(AFT)是一類真菌(如黃曲雷和寄生曲霉)的有毒的代謝產物,其衍生物有約20種,分別命名為B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等,其中以B1的毒性大,致癌性z強。(歡迎索取紙質數據。)

 

h曲霉毒素主要存在于藥材、谷物、堅果、棉籽以及動物飼料相關的產品中。當人攝入量大時,可發生急性中毒,出現急性肝炎、出血性環死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。當微量持續攝入,可造成慢性中毒,生長障礙,引起纖維性病變,致使纖維組織增生。


各級食品藥品監管部門不斷加大中藥生產流通監管力度,努力保持中藥質量總體穩定。

 

色譜條件

色譜柱:月旭Ultimate® ODS-3 (4.6×300mm,5μm);

流動相:甲醇/乙腈/水=300/220/480;

柱溫:30℃;

檢測波長: 激發波長:360nm,

發射波長:450nm;

衍生方法:光化學衍生;

流速:0.8mL/min;

進樣量:25μl。

 

流動相的配置

流動相配制:精密量取甲醇300ml、乙腈220ml、超純水480ml,充分混勻后經0.45 μm濾膜抽濾,即得。

 

樣品溶液的制備

標準儲備液:精密量取h曲霉毒素混合對照品溶液(h曲霉毒素B1、h曲霉毒素B2、h曲霉毒素G1、h曲霉毒素G2標示濃度分別為1.0μg/ml、0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/ml)1ml,置于20ml容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,作為標準儲備液,搖勻,備用。

 

混合對照品溶液:精密量取標準儲備液1ml,置于25ml容量瓶,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。

 

供試品溶液:取供試品粉末15g,精密稱定,置于均質瓶中,加入氯化鈉3g,精密加入70%甲醇75ml。高速攪拌2分鐘(攪拌速度大于11000r/min);離心5分鐘(離心速度4000 r/min),精密量取上清液15ml,置于50ml容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,離心10分鐘(4000 r/min),精密量取上清液20ml,通過月旭Welchrom®h曲霉毒素免疫親和小柱,流速3ml/min,用20ml水洗脫,棄去洗脫液,使空氣進入柱子,再用1.5ml甲醇洗脫,收集洗脫液,置于2ml容量瓶,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,用微孔濾膜過濾,取續濾液,即得。

 

標準曲線的繪制

分別精密吸取上述混合對照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl注入液相色譜儀,測定峰面積。以進樣量為橫坐標,峰面積為縱坐標繪制標準曲線。

 

結果匯總

中藥中h曲霉毒素測定結果匯總

 

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