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Hoechst 33342是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料

時間:2022/6/15閱讀:2488
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Hoechst 33342是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料


Hoechst 33342它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光,對細胞的毒性較低,常被稱為DNA探針。實驗研究中Hoechst 33342常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測,也可以用于普通的細胞核染色,或常規的DNA染色。活細胞和固定的細胞均可標記。Hoechst 33342是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光,對細胞的毒性較低,常被稱為DNA探針。實驗研究中Hoechst 33342常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測,也可以用于普通的細胞核染色,或常規的DNA染色。活細胞和固定的細胞均可標記。




產品參數


別名:HOE 33342;bisBenzimide;二苯甲亞胺, 三氯化氫 2-(4-乙基苯基)-5-(4-甲基-1-哌-嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑


CAS:23491-52-3


分子式:C27H28N6O·3HCl


分子量:561.93 


性狀:暗黃色粉末


溶解性:溶于水(20mg/mL)


使用方法


配制儲存液


用無菌超純水配制成1-5 mg/ml的儲存液于4℃避光保存。使用時用PBS或者其他合適緩沖液將其稀釋成0.5-10μg/ml工作液。


A:固定的細胞或組織染色


對于固定的細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst33342染色。或者直接進行后續的Hoechst 33342染色。


a)對于貼壁細胞或組織切片:加入適量Hoechst 33342染色液,覆蓋住樣品即可。


b)對于懸浮細胞:至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。


c)吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。


d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長350 nm,發射波長460 nm。


B:活細胞或組織染色


1) 細胞培養物中加入適量Hoechst 33342染色液,充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液,對于96孔板一個孔需加入100μl染色液。     


2) 在 37℃培養細胞 10~20 分鐘。


3) 用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。


4) 封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長350nm,發射波長460nm。


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