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XND-42 大孔吸附樹脂提純發酵液中紫杉醇的研究

時間:2022/12/14閱讀:319
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  采用 XND-42 型大孔樹脂對紅豆杉產紫杉醇內生真菌發酵液的粗提液進行吸附和洗脫試 驗, 同時應用 HPLC 進行分析檢測, 確定了工藝條件。 XND-42 型吸附樹脂對紫杉醇 生產廠家;天津市西金納環保材料科技有限公司;有吸附分離效果。優化工藝條件為: 室溫下, 樣品溶于體積分數 50%甲醇- 水溶液, 上柱液體積流量 1 ?5 mL/ min, 體積分數 80%乙醇- 水溶液以體積流量 5 mL/ min 洗脫, 洗脫劑用量為 7 倍量樹脂體積, 回收率達 90% 。紫杉醇(T axol)是一種經次生代謝而產生的四環二萜酯, 不僅具有強抗癌活性 [ 1] , 而且還具有誘導細胞凋亡 [ 2] , 調節機體的免疫 [ 3] 等作用。目前紫杉醇主要從紅豆杉的樹皮中提取, 其含量低微且資源緊缺。自從 1993 年 Stierle 與 Stroble [ 4] 報道了從太平洋紫杉樹中分離出一種可產紫杉醇的內,生真菌( Taxomyces andreanae) 以來, 利用產紫杉醇內生真菌進行大規模發酵生產紫杉醇被認為是具有廣闊的前景的方法之一, 也將是紫杉醇來源的重要途徑[ 5]。利用內生真菌發酵生產紫杉醇的一個關鍵步驟是篩選并構建高產紫杉醇的菌株。篩選過程往往是先對其進行 PDA 培養, 然后用有機溶劑提取發酵物中的紫杉醇, 后用 H PLC 法對提取物進行紫杉醇檢測[ 6- 7]。但是由于在發酵過程中不同種屬的微生物會產生有不同吸收波長的色素、蛋白等雜質, 致使色譜柱損耗大、 效率低, 也影響液相色譜的精確度, 因此很有必要對紫杉醇提取液進行柱前預處理。生真菌( Taxomyces andreanae) 以來, 利用產紫杉醇內生真菌進行大規模發酵生產紫杉醇被認為是具有廣闊的前景的方法之一, 也將是紫杉醇來源的重要途徑[ 5]。利用內生真菌發酵生產紫杉醇的一個關鍵步驟是篩選并構建高產紫杉醇的菌株。篩選過程往往是先對其進行 PDA 培養, 然后用有機溶劑提取發酵物中的紫杉醇, 最后用 H PLC 法對提取物進行紫杉醇檢測[ 6- 7]。但是由于在發酵過程中不同種屬的微生物會產生有不同吸收波長的色素、蛋白等雜質, 致使色譜柱損耗大、 效率低, 也影響液相色譜的精確度, 因此很有必要對紫杉醇提取液進行柱前預處理。 天津西金納環保科技有限公司大孔吸附樹脂是近年來新 發展起來的一 種有機高分子聚合物吸附劑 [ 8] , 其應用日 趨廣泛, 特別是在天然產物的分離純化方面逐漸顯示 出其*性[ 9], 其中 XND-42 型大孔樹脂在純化紫杉醇浸膏中表現出色 [ 10] 。然而, 研究大孔吸附樹脂吸附分離純化發酵液中紫杉醇很少見。選用 非極性大孔吸附樹脂 XND-42 對發酵液中的紫杉醇 進行分離純化, 優化提取工藝參數.

 




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