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一、生長量測定法
1、體積測量法：又稱測菌絲濃度法
通過測定一定體積培養液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況.方法是,取一定量的待測培養液(如 10毫升)放在有刻度的離心管中,設定一定的離心時間(如5分鐘)和轉速(如5000 rpm),離心后,倒出上清夜,測出上清夜體積為v,則菌絲濃度為(10-v)/10.菌絲濃度測定法是大規模工業發酵生產上微生物生長的一個重要監測指標.這種方法比較粗放,簡便,快速,但需要設定一致的處理條件,否則偏差很大,由于離心沉淀物中夾雜有一些固體營養物,結果會有一定偏差。
2、稱干重法
可用離心或過濾法測定.一般干重為濕重的10-20%.在離心法中,將一定體積待測培養液倒入離心管中,設定一定的離心時間和轉速,進行離心,并用清水離心洗滌1-5次,進行干燥.干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干,或采用紅外線烘干,也可在80℃或40℃下真空干燥,干燥后稱重.如用過濾法,絲狀真菌可用濾紙過濾,細菌可用醋酸纖維膜等濾膜過濾,過濾后用少量水洗滌,在40℃下進行真空干燥.稱干重發法較為煩瑣,通常獲取的微生物產品為菌體時,常采用這種方法,如活性干酵母(activity dry yeast, ADY),一些以微生物菌體為活性物質的飼料和肥料。
3、比濁法
微生物的生長引起培養物混濁度的增高.通過紫外分光光度計測定一定波長下的吸光值,判斷微生物的生長狀況.對某一培養物內的菌體生長作定時跟蹤時,可采用一種特制的有側臂的三角燒瓶.將側臂插入光電比色計的比色座孔中,即可隨時測定其生長情況,而不必取菌液.該法主要用于發酵工業菌體生長監測.如我所使用UNICO公司的紫外-可見分光光度計,在波長600nm 處用比色管定時測定發酵液的吸光光度值OD600,以此監控E.Coli的生長及誘導時間.
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