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iTRAQ蛋白質組學
iTRAQ蛋白質組學
?簡單介紹：
蛋白質組分析(proteomics) 是對生物蛋白組(proteome) 的分析與檢測，蛋白組分析先要將混合蛋白質分離, 分離的主要方法是蛋白雙向電泳。已被分離的蛋白質由質譜分析對其進行鑒定。
的4種同位素標記試劑由４種相對分子質量分別為114、115、116和117的報告基團(reporter group)，相對分子質量分別為31、30、29 和28 的質量平衡基團(balance group)以及一個相同的肽反應標記試劑基團(peptide reactive group)組成。不同的報告基團分別與相應的平衡基團相配后，相對分子質量均為145，即等量異位標簽(isobaric tag)。
將蛋白質裂解為肽段，然后用iTRAQ試劑進行差異標記。由于iTRAQ試劑是等量的，即不同同位素在標記同一多肽后在*級質譜檢測，分子量相同，用串聯質譜方法對在*級質譜檢測到前體離子(precursor ion)進行碰撞誘導解離，產物離子通過第二級質譜進行分析。在二級質譜分析過程中，報告基團、質量平衡基團和多肽反應基團之間的鍵斷裂，質量平衡基團丟失，產生低質荷比(m/z)的報告離子。由于二級質譜可分析相對分子質量相差1的報告基團，不同報告基團離子強度的差異就代表了它所標記的多肽的相對豐度。同時，多肽內的酰胺鍵斷裂，形成一系列b 離子和y 離子，得到離子片段的質量數，通過數據庫查詢和比較，可以鑒定出相應的蛋白質前體.
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