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上海申知心生物科技有限公司
主營產品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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更新時間：2025-05-09 16:37:00瀏覽次數：1361
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煙熏法（Cigarette Smoke Exposure, CSE）
操作流程：
將大鼠置于自制煙熏箱中，每日點燃香煙（如10支/次），進行被動吸煙（1-2次/天，每次30-60分鐘），持續24-36周。
煙熏期間需監測箱內溫度、濕度及空氣流速，避免缺氧或過熱。
特點：
接近人類自然病程，模擬吸煙導致的氣道炎癥、黏液分泌增加及肺氣腫。
周期長（需≥8周），但病理特征穩定，適用于長期機制研究。
蛋白酶滴注法（如彈性蛋白酶、木瓜蛋白酶）
操作流程：
麻醉大鼠后，經氣管插管滴注蛋白酶（如豬胰彈性蛋白酶PPE 0.2-0.6 U/kg或木瓜蛋白酶6 U/kg），每周1次，持續4-20周。
特點：
快速誘導肺泡結構破壞（4周可見肺大皰），適用于急性肺氣腫研究。
可能伴隨高死亡率，需嚴格劑量控制。
LPS聯合煙熏法（CSE+LPS）
操作流程：
煙熏基礎上，于第1、14、28天經氣管滴注脂多糖（LPS 200 μg/只），總周期縮短至4-12周。
特點：
協同增強炎癥反應（TNF-α、IL-8顯著升高），更接近中重度COPD。
操作復雜但時間效率高，適合藥物療效評價。
多因素復合模型
方法：煙熏+LPS+蛋白酶（如PPE）或疊加空氣污染物（臭氧、二氧化硫）。
特點：
綜合模擬多致病因素（吸煙+感染+環境污染），病理改變更全面。
實驗復雜度高，需多學科協作。
行為學與功能指標
肺功能檢測：
強制呼氣流量（FEV50/FVC）下降、殘氣量（FRC）升高，提示氣流受限。
體重監測：長期煙熏組體重增長緩慢。
病理學指標
肺泡結構破壞：肺泡腔擴張、間隔斷裂（HE染色）。
炎癥浸潤：支氣管周圍巨噬細胞、中性粒細胞聚集（Masson染色）。
氣道重塑：膠原沉積、平滑肌增生（免疫組化檢測α-SMA）。
分子生物學指標
炎癥因子：血清IL-8、TNF-α顯著升高。
蛋白酶失衡：MMP-9/TIMP-1比值升高。
影像學評估
Micro-CT：肺大皰形成、局部密度減低，與病理結果一致。
| 方法 | 周期 | 病理特征匹配度 | 操作復雜度 | 適用場景 |
|---|---|---|---|---|
| 單純煙熏法 | 24-36周 | 高（自然病程） | 中等 | 長期機制研究、藥物預防評價 |
| 蛋白酶滴注法 | 4-8周 | 中（急性肺氣腫） | 低 | 快速篩選抗肺氣腫藥物 |
| LPS聯合煙熏法 | 4-12周 | 高（中重度COPD） | 高 | 炎癥機制與治療靶點研究 |
| 多因素復合模型 | 8-16周 | ji高（綜合病理） | ji高 | 復雜環境因素交互作用研究 |
動物選擇：優先雄性SD大鼠（體重180-250g），避免激素干擾。
操作細節：
LPS滴注時需緩慢注射，避免嗆咳導致藥物噴出。
煙熏箱設計需透明、通風，確保煙霧均勻分布。
環境控制：維持溫度22-25℃、濕度50-60%，減少非實驗變量影響。
替代與優化：
基因編輯技術（如CRISPR敲除α-1抗胰蛋白酶基因）可模擬遺傳性COPD。
體外模型（氣液界面培養）用于高通量藥物篩選。
