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上海一研生物科技有限公司

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費氏弧菌發光桿菌轉接培養流程

閱讀:1805      發布時間:2018-5-24
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費氏弧菌發光桿菌轉接不同于細菌、酵母等,其固體斜面和平板培養物多為菌絲體,用傳統的劃線方法很難將菌絲挑起,并且接種效果差。因此,霉菌固體轉接通常采用切塊法。切塊轉接需要的工具有:①接種鏟、②接種鋤。
平板傳代培養

1.將接種鏟和接種鋤用酒精棉擦拭干凈,風干后在酒精燈外焰前后上下翻轉灼燒10s,放置冷卻;

2.打開試管,將試管口邊緣灼燒一圈;用冷卻的接種鋤在試管中,相距0.5cm切兩條平行線(與試管垂直);

3.用冷卻的接種鏟在兩條平行線之間,相距0.5cm切兩條平行線(與試管平行),形成0.5×0.5cm2的正方形菌塊;

4.接種鏟直接插入菌塊底部挑起,平放到新的平板(固體瓊脂表面)上;

5.平板正置放入培養箱,如無特殊要求,培養溫度25-28℃;

注意:切塊要干凈利落,勿重復切割,使菌絲嚴重受損,影響轉接效果。

液體搖床培養

1.準備生長旺盛的新鮮平板培養物一個;

2.根據上述方法切塊,6-8塊/(裝液100mL/250mL)、3-4塊/(裝液40mL/100mL),置于三角瓶中,用八層紗布封口,搖床培養;

3.如無特殊要求,培養溫度25-28℃;根據菌球大小需要,調節轉速,一般轉速越大,形成菌球越小,費氏弧菌發光桿菌液越渾濁;轉速越小,菌球越大,菌液越澄清。

 葡萄糖調節蛋白78IgG 人單核增多性李斯特菌素O((LLO) 

 葡萄糖調節蛋白94IgG 人單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)

 葡萄糖轉運蛋白12IgG 人單胺氧化酶(MAO)

 葡萄糖轉運蛋白1IgG 人大皰性類天皰瘡(BP)

 葡萄糖轉運蛋白2IgG 人大內皮素(Big ET)

 葡萄糖轉運蛋白3IgG 人大腸菌素(colicin)

 葡萄糖轉運蛋白4IgG 人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)

 葡萄糖轉運蛋白5IgG 人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)
費氏弧菌發光桿菌

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