費氏弧菌發光桿菌菌種的傳代和保藏
按照實驗室制定的菌種使用與管理規程進行傳代和保藏。美國藥典(USP)中規定:“將微生物接種至一新鮮培養基上/內,每萌發一次即稱為一代”,因此,當原始菌種復溶并轉至一培養基內生長,即認為已傳代一次,”并規定“菌種的傳代次數(自原始菌種凍干粉起)不得超過5代”。我國的GMP認證中也如此要求,并且中國藥典2005年版藥典也已做出“菌種的傳代次數(自原始菌種凍干粉起)不得超過5代”這個明確的規定。這就要求微生物實驗室必須具有一種簡便易行的方法,既保證菌種的長期有效,叉避免頻繁購買菌種及復壯菌種等費時耗力的工作。
在這個方法中,費氏弧菌發光桿菌菌種被分為兩類,傳代用菌種和工作用菌種,傳代用菌種用甘油冷凍管法保藏,工作用菌種用斜面低溫保藏法保藏。
實驗證明,甘油冷凍管的有效期至少為2年,zui早的甘油冷凍管代數為第2代(G2),以每隔兩年轉接一次計算,轉至第4代時(G4),需耗時6年,即一支凍干管內提供的菌種,按照此方法保藏使用可在6年內為整個實驗室提供有效菌種,從而使菌種傳代和保藏工作大大簡化。但是,費氏弧菌發光桿菌這種方法主要適用于細菌、酵母菌的傳代、保藏,對真菌和芽胞類細菌則需應用其他方法。
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