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菌種的保存措施和注意事項

閱讀:589      發(fā)布時間:2017-01-17
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菌種的保存措施和注意事項

菌種保存的zui終目的,是能夠在以后的時間使用該菌種。要達(dá)到這個目的,一般同時結(jié)合以下的三方面的措施:
1.取生命力zui旺盛的對數(shù)期階段的菌種,該階段菌種生命力zui為頑強,能夠更好的耐受保存過程中溫度的變化。
2.通過降低溫度,使細(xì)菌其進(jìn)入“休眠狀態(tài)”,保存過程中該菌種處于zui低的代謝活動。
3.降低細(xì)菌在降溫“休眠過程”和升溫“復(fù)蘇過程”中,溫度變化對菌種的傷害。
為目前較多實驗室所常用的甘油保存法的改進(jìn)方法,可以簡述為“甘油小瓷珠保存法”。產(chǎn)品保存時,將菌種刮取或轉(zhuǎn)移至菌種保存管中,上下顛倒保存管,重力作用下,菌種均勻分布于凍存保護(hù)液中。將凍存管中的全部凍存液吸取出菌種保存管。密布凹孔的小瓷珠,擴大了小瓷珠的表面張力,在表面張力作用下,每個小瓷珠的表面僅僅覆蓋著一層凍存保護(hù)液,而菌種則存在于這層保護(hù)液之中。
產(chǎn)品使用時,從-20/-40/-80冰箱中拿出菌種存管,輕輕晃動。由于此時的保存管內(nèi)已沒有聚集的液體,瓷珠在低溫下也會很容易相互分離,而不必像傳統(tǒng)甘油法保存時需要很長的甘油融化時間。隨后,用接種針任取一瓷珠,就可直接在平板上劃線接種或置于增菌液中培養(yǎng)。接種完成后,立即將該菌種保存管置于原有的保存環(huán)境中,由于此種方法能夠快速的取用菌株,因此,菌種保存管內(nèi)部溫度的波動相當(dāng)?shù)男 R虼耍軌驑O大避免保存溫度的大幅波動對的菌種的傷害。
注意事項:1、被保存的菌種要求是經(jīng)過純化后培養(yǎng)18-24h內(nèi)的新鮮菌種(細(xì)菌18-24h,酵母菌需3天,形成孢子的微生物保存孢子,而放線菌和絲狀真菌需培養(yǎng)7天后保存),不宜使用老化或未經(jīng)鑒定的菌種。
2、做厭氧菌保存時,應(yīng)提供厭氧的環(huán)境,如厭氧箱、厭氧袋,菌種保存管中可通入氮氣來驅(qū)除保存菌種時所引入的氧氣。菌種復(fù)蘇時,也要創(chuàng)造厭氧的環(huán)境。
3、菌種復(fù)蘇完成后,對使用菌株需要進(jìn)行再次純化,以保證菌株的單一性。
4、菌種保存濃度必須要做3-4麥?zhǔn)媳葷岫龋缃臃N濃度過低將會降低復(fù)蘇效果。
5、待保存于菌種保存管中的菌種*乳化均勻吸附在多孔小瓷珠后,要將多余的菌種保存液吸取出來并棄之,否則在復(fù)蘇時的凍融過程中會損傷菌株活性。

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