化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
LabAssay™ LDL-膽/固/醇
LabAssay™ LDL-Cholesterol
Cholesterol以脂蛋白的微粒形式在體內(nèi)循環(huán)。脂蛋白種類多樣，其中，由LDL（低密度脂蛋白）攜帶的Cholesterol被稱為LDL-Cholesterol。
LDL將肝臟產(chǎn)生的Cholesterol運往全身。當血液中的LDL含量高時，會在血管壁上沉積，引起動脈硬化，導(dǎo)致心肌梗塞或腦梗塞。人體內(nèi)的LDL-Cholesterol正常范圍為140 mg/dL以下，超過140 mg/dL則會被視為高LDL-Cholesterol血癥。
本產(chǎn)品可檢測血液（血清/血漿）中的LDL-Cholesterol。通過使用微孔板可快速簡便地檢測樣品中的LDL-Cholesterol，且無需離心分離脂蛋白。
※LabAssay™ 系列產(chǎn)品僅供實驗研究用，不能用于臨床診斷。
◆試劑盒性能
| 物種 | 人、小鼠、大鼠 |
| 樣品 | 血清、血漿 |
| 標準曲線范圍 | 9.38-300 mg/dL |
| 所需樣品量 | 5 μL |
| 檢測時間 | 20 min |
| 檢測法 | 顯色法 (主波長 600 nm/副波長 700 nm) |
◆標準曲線示例
◆原理
第一反應(yīng)階段（清除非LDL-Cholesterol）
前處理液中的親水基和疏水基可保護樣品中的LDL免受Cholesterol氧化酶（CO）和Cholesterol酯酶（CHE）的影響。此外，LDL以外的脂蛋白，如乳糜微粒（CM）、極低密度脂蛋白（VLDL）和高密度脂蛋白（LDL）中的Cholesterol（非LDL-Cholesterol）會在CO和CHE的作用下分解為脂肪酸和Δ4- 膽甾烯酮，同時生成過氧化氫。而生成的過氧化氫會在過氧化氫酶的作用下被分解為水。
第二反應(yīng)階段（LDL-Cholesterol顯色）
反應(yīng)試劑發(fā)揮作用時，LDL中的Cholesterol在CO和CHE的作用下生成過氧化氫。生成的過氧化氫在在過氧化物酶（POD）的作用下會使N-（3-硫代丙基）-3-甲氧基-5-jia基苯胺（HMMPS）和4-氨基安替/比林發(fā)生定量氧化縮合，生成一種藍色色素。通過檢測這種藍色的吸光度，可確定樣品中的LDL-Cholesterol濃度。
◆數(shù)據(jù)
精確度測試（批內(nèi)差異）
使用本產(chǎn)品分別對人、小鼠、大鼠的2種濃度血清樣品進行5次重復(fù)檢測，確認精確度。
n＼ID | 人 | 小鼠 | 大鼠 | |||
ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | |
1 | 160 | 46 | 141 | 48.3 | 119 | 33.3 |
2 | 156 | 43.8 | 138 | 47.9 | 114 | 34.1 |
3 | 158 | 44.7 | 138 | 49.5 | 119 | 33.3 |
4 | 166 | 44.5 | 139 | 48.5 | 112 | 34.9 |
5 | 159 | 45.7 | 136 | 50.6 | 113 | 33.3 |
平均值 | 160 | 44.9 | 138 | 49 | 115 | 33.8 |
SD | 3.8 | 0.9 | 1.8 | 1.1 | 3.4 | 0.72 |
CV(%) | 2.4 | 2 | 1.3 | 2.2 | 2.9 | 2.1 |
【結(jié)果】
人血清的CV（%）為2.0-2.4％，小鼠血清的CV（%）為1.3-2.2％，大鼠血清的CV（%）為2.1-2.9％，結(jié)果良好。
再現(xiàn)性測試（批間差異）
使用本產(chǎn)品在4天內(nèi)分別對3種不同濃度的人、小鼠、大鼠血清樣品進行3次重復(fù)檢測。
Day＼ID | 人 | 小鼠 | 大鼠 | ||||||
ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID3 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID3 (mg/dL) | ID1 (mg/dL) | ID2 (mg/dL) | ID3 (mg/dL) | |
1 | 125 | 88.1 | 41.8 | 119 | 91.4 | 48.4 | 130 | 78.7 | 45.2 |
2 | 124 | 87 | 41.1 | 119 | 88.1 | 45 | 129 | 76.1 | 42.9 |
3 | 130 | 91.5 | 41.7 | 118 | 88 | 48.2 | 126 | 74.2 | 49.7 |
4 | 125 | 89.5 | 39.8 | 126 | 95.1 | 50.4 | 131 | 74.5 | 49.4 |
平均值 | 126 | 89 | 41.1 | 121 | 90.7 | 48 | 129 | 75.9 | 46.8 |
SD | 2.7 | 1.9 | 0.92 | 3.7 | 3.4 | 2.2 | 2.2 | 2.1 | 3.3 |
CV(%) | 2.1 | 2.2 | 2.2 | 3.1 | 3.7 | 4.7 | 1.7 | 2.7 | 7.1 |
【結(jié)果】
人血清樣品的CV（%）為2.1%-2.2%、小鼠血清樣品的 CV（%）為3.1-3.7%，大鼠血清樣品的 CV（%）為1.7-7.1%，所有結(jié)果均良好。
稀釋線性試驗
使用產(chǎn)品附帶的標準品稀釋液，按倍數(shù)稀釋2種濃度的人血清/血漿（EDTA）、小鼠血清/血漿（EDTA）和大鼠血清/血漿（EDTA）后，進行檢測并確認線性關(guān)系（平行檢測兩次）。
【結(jié)果】
檢測范圍內(nèi)均顯示出良好的線性關(guān)系。
加標回收測試
向人血清/血漿（EDTA）、小鼠血清/血漿（EDTA）和大鼠血清/血漿（EDTA）中添加3種濃度的標準品，并進行加標回收測試（平行檢測兩次）。
人
添加量(mg/dL) | 實測值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) | |
血清 | - | 75.2 | - | - |
7.12 | 82.3 | 7.1 | 100 | |
28.5 | 103 | 27.8 | 97.5 | |
35.6 | 112 | 36.8 | 103 | |
血漿 （EDTA） | - | 84.5 | - | - |
10.6 | 93.8 | 9.3 | 87.7 | |
21.2 | 107 | 22.5 | 106 | |
26.5 | 112 | 27.5 | 104 |
小鼠
添加量(mg/dL) | 實測值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) | |
血清 | - | 86.6 | - | - |
15.9 | 102 | 15.4 | 96.9 | |
23.8 | 112 | 25.4 | 107 | |
39.7 | 126 | 39.4 | 99.2 | |
血漿 (EDTA) | - | 97.7 | - | - |
14.4 | 112 | 14.3 | 99.3 | |
28.9 | 126 | 28.3 | 97.9 | |
36.1 | 133 | 35.3 | 97.8 |
大鼠
添加量(mg/dL) | 實測值(mg/dL) | 回收量(mg/dL) | 回收率(%) | |
血清 | - | 14.6 | - | - |
13.7 | 28.7 | 14.1 | 103 | |
41 | 53 | 38.4 | 93.7 | |
68.4 | 77.1 | 62.5 | 91.4 | |
血漿 （EDTA） | - | 16.2 | - | - |
16 | 31.9 | 15.7 | 98.1 | |
48.1 | 64.4 | 48.2 | 100 | |
80.2 | 90.6 | 74.4 | 92.8 |
【結(jié)果】
均得到良好的回收率。
實際樣品的檢測
使用本產(chǎn)品檢測人血清/血漿、小鼠（ICR）血清/血漿樣品和大鼠（SD）血清/血漿。
人
樣品No. | 檢測值 (mg/dL) | 平均值 (mg/dL) | SD | CV(%) | ||
血清 | 1 | 189 | 187 | 188 | 1.4 | 0.75 |
2 | 88.8 | 93.2 | 91 | 3.1 | 3.4 | |
3 | 85.7 | 85.7 | 85.7 | 0 | 0 | |
4 | 99 | 93.9 | 96.5 | 3.6 | 3.7 | |
5 | 95.8 | 94 | 94.9 | 1.3 | 1.3 | |
血漿 （EDTA） | 1 | 122 | 121 | 122 | 0.71 | 0.58 |
2 | 88.3 | 88 | 88.2 | 0.21 | 0.24 | |
3 | 85.9 | 84.4 | 85.2 | 1.1 | 1.2 | |
4 | 93.9 | 97.2 | 95.6 | 2.3 | 2.4 | |
5 | 95.1 | 95.4 | 95.3 | 0.21 | 0.22 | |
小鼠
樣品No. | 檢測值 (mg/dL) | 平均值 (mg/dL) | SD | CV(%) | ||
血清 | 1 | 32.6 | 33.4 | 33 | 0.57 | 1.7 |
2 | 33.6 | 31.3 | 32.5 | 1.6 | 5 | |
3 | 33.4 | 32.4 | 32.9 | 0.71 | 2.1 | |
4 | 34.5 | 33.4 | 34 | 0.78 | 2.3 | |
5 | 36.1 | 34.1 | 35.1 | 1.4 | 4 | |
血漿 | 1 | 21.2 | 20.8 | 21 | 0.28 | 1.3 |
2 | 16 | 17.7 | 16.9 | 1.2 | 7.1 | |
3 | 25.5 | 21.2 | 23.4 | 3 | 13 | |
4 | 19.1 | 20.3 | 19.7 | 0.85 | 4.3 | |
5 | 18.9 | 19.6 | 19.3 | 0.49 | 2.6 | |
大鼠
樣品No. | 檢測值 (mg/dL) | 平均值 (mg/dL) | SD | CV(%) | ||
血清 | 1 | 43.3 | 37.9 | 40.6 | 3.8 | 9.4 |
2 | 44.4 | 42.3 | 43.4 | 1.5 | 3.4 | |
3 | 42.7 | 44 | 43.4 | 0.92 | 2.1 | |
4 | 44.9 | 43.2 | 44.1 | 1.2 | 2.7 | |
5 | 50 | 51.1 | 50.6 | 0.78 | 1.5 | |
血漿 | 1 | 30.7 | 30.1 | 30.4 | 0.42 | 1.4 |
2 | 33.7 | 32.8 | 33.3 | 0.64 | 1.9 | |
3 | 39.2 | 36.5 | 37.9 | 1.9 | 5 | |
4 | 30.7 | 30.9 | 30.8 | 0.14 | 0.46 | |
5 | 33.9 | 36.7 | 35.3 | 2 | 5.6 | |
◆Q＆A
關(guān)于樣品
Q1 使用哪種樣品比較合適？
A1 請盡量使用新鮮的血清/血漿樣品，避免使用反復(fù)凍融的樣品，否則可能會導(dǎo)致脂蛋白變性。
Q2 使用哪種血漿抗凝劑比較合適？
A2 可使用肝素、檸檬酸鹽或EDTA，它們在正常的使用量下幾乎不會影響檢測值。
Q3 如何檢測超過檢測范圍上限的樣品？
A3 對于超過檢測范圍上限的樣品，請使用生理鹽水稀釋后再進行檢測。將得到的值乘以稀釋倍數(shù)即可得出檢測值。
Q4 如何檢測甘油三酯水平較高（1000mg/dL）的血清樣品？
A4 對于甘油三酯水平超過1000mg/dL的血清樣品，請使用生理鹽水稀釋后再進行檢測。將得到的值乘以稀釋倍數(shù)即可得出檢測值。
關(guān)于試劑盒使用
Q1 使用本試劑盒檢測時需要什么器具和裝置？
A1 使用本產(chǎn)品時所需的器具和裝置如下。
● 微孔板（透明，96 孔）
● 微量移液器
● 恒溫水浴鍋（37°C）
● 微孔板搖床（混勻儀）
● 酶標儀（600 nm/700 nm濾光片）
Q2 標準品中應(yīng)添加多少純凈水？
A2 標準品中添加的純凈水量因批次不同而有所差異，具體請參考試劑盒附帶的說明書中的量。
◆產(chǎn)品列表
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 |
| 291-96701 | LabAssay™ LDL-Cholesterol | 100 tests | 細胞生物學用 |
相關(guān)產(chǎn)品
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
| 635-50981 | LabAssay™ Cholesterol | 100 tests |
| 299-96501 | LabAssay™ LDL-Cholesterol | 100 tests |
化工儀器網(wǎng)