肺炎支原體PCR試劑盒

Mycoplasma pneumoniae

產品及特點

肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae ）是人類支原體肺炎的病原體。 支原體肺炎的病理改變以間質性肺炎為主，有時并發支氣管肺炎，稱為原發性 非典型性肺炎。主要經飛沫傳染，潛伏期 2-3 周，發病率以青少年高。臨床 癥狀較輕，甚至根本無癥狀，若有也只是頭痛、咽痛、發熱、咳嗽等一般的呼 吸道癥狀，但也有個別死亡報道。一年四季均可發生，但多在秋冬時節。本試 劑盒是根據 PCR 原理開發，具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需準備樣品 DNA 模板。

2. 根據肺炎支原體保守區設計引物。

3. 特異性高，跟其他微生物無交叉反應。

4. 靈敏高，可檢測低至幾個拷貝/反應的支原體污染。

5. 提供內參和無感染性的支原體陽性對照（DNA 段），能有效避免實驗結 果的假陽性和假陰性。

6. 可用于培養細胞、疫苗、血清、重組蛋白和耗材的污染檢測。但不能用于 臨床診斷。

7. 本產品足夠至少 50 次 40μL 體系 PCR 檢測(含陽性對照和陰性對照反應)。

肺炎支原體PCR試劑盒規格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設置 PCR 反應（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設置 PCR 反應：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。