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供貨周期 | 一周 | 規格 | 50T |
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貨號 | XY-0318 | 應用領域 | 醫療衛生,環保,化工,生物產業,農林牧漁 |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 |
貓冠狀病毒RT-PCR試劑盒
Feline Coronavirus(FCoV )
產品及特點
貓傳染性腹膜炎(FIP,Feline Infectious Peritonitis)是目前導致貓死亡的重 要原因之一,它是由貓冠狀病毒(FCoV,Feline Coronavirus)引起。貓冠狀病 毒是高度傳染性病毒,偏好發生在數量及種類繁多的家養貓。因此,FCoV 的快速 準確鑒定,對該病的預防和檢疫有著重要作用。為此本公司開發了本產品,采用 RT-PCR 技術檢測疑似感染動物血清或組織中的 FCoV。它具有下列特點:
1. 使用一管式 RT-PCR 試劑盒,減少了操作步驟,降低了操作誤差。
2. 靈敏度高于過去使用的 ELISA 方法,能達到至少 1000 拷貝/反應。
3. 簡單快速,用戶不需單獨準備每種試劑。
4. 針對貓冠狀病毒 S 基因的保守區設計,檢測的特異性強。
5. 用于 FCoV 的定性鑒定檢測和分子流行病學調查。
貓冠狀病毒RT-PCR試劑盒規格及成分
編號 | 成 份 | 規格 |
試劑一 | 雙酶一管式 RT-PCR Buffer,2× | 750 uL |
試劑二 | MMLV-Taq Mix | 100 uL |
試劑三 | CCV 專一性引物對 | 100 uL |
試劑四 | CCV 陽性對照(10E8 拷貝/uL) | 50 uL |
試劑五 | 超純水 | 1 mL |
試劑六 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑 一管式病毒 RNAout 或柱式病毒 RNAout
使用方法 一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化可能含 CCV 樣品的 RNA,也可以另購本公司的一管式病毒 RNAout 或柱式病毒 RNAout,上述兩款產品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對照
1. 為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對 照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。 在專門的區域操作。
三、設置 RT-PCR 反應(30 uL 體系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成分 | 樣品 | 陽性對照 | 陰性對照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer,2× | 15 uL | 15 uL | 各15 uL |
CCV 專一性引物對 引物混合物 | 2μL | 2μL | 2μL |
樣品 RNA | 1-5 uL |
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CCV 陽性對照 |
| 2 uL |
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補超純水到 | 28 uL | 28 uL | 28 uL |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
4. 輕柔混勻后上機,按下面參數進行 RT-PCR。
過程 | 溫度 | 時間 |
逆轉錄 | 60℃ | 30 分鐘 |
預變性 | 94℃ | 2 分鐘 |
PCR 反應 (30 個循環) | 94℃ | 30 s |
49℃ | 30 s | |
72℃ | 30 s | |
延伸 | 72℃ | 5 分鐘 |
5. 電泳檢測 RT-PCR 產物。預期的 PCR 產物長度為 384bp。
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