GIBCO中文版細胞培養手冊

細胞培養簡介 . 2
什么是細胞培養？ . 2
有限細胞系與連續細胞系 . 2
培養條件2
凍存 2
培養細胞的形態 3
細胞培養的應用 3
細胞培養實驗室 4
安全 4
生物安全性等級 4
安全數據表 5
安全設備 5
個人防護設備 (PPE) . 5
實驗室安全規范 5
細胞培養設備 . 6
基本設備 6
擴增設備  6
其他用品. 6
細胞培養實驗室 . 7
無菌工作區域 . 7
細胞培養通風櫥 7
細胞培養通風櫥布局 . 8
培養箱 . 9
儲存 9
低溫儲存 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10
細胞計數器 10
無菌技術 11
簡介 11
無菌工作區域 . 11
良好的個人衛生 11
無菌試劑和培養基 . 12
無菌操作12
無菌技術核對表 . 13
ii | 細胞培養基本知識
目錄
生物污染 14
簡介 14
細菌 . 14
酵母 15
霉菌 15
病毒 16
支原體 . 16
交叉污染 .17
抗生素的使用 . 17
細胞培養基本知識 18
細胞系 18
選擇合適的細胞系 . 18
獲取細胞系 18
培養環境 19
貼壁培養與懸浮培養 . 19
培養基 . 20
pH 值 . 21
二氧化碳 .21
溫度 21
細胞形態 22
哺乳動物細胞 . 22
哺乳動物細胞形態差異 22
293 細胞的形態 . 23
昆蟲細胞 24
Sf21 細胞的形態 24
Sf9 細胞的形態 25
方法 26
細胞培養維持指導原則 26
什么是傳代？ . 26
何時傳代？ 27
常用細胞系推薦使用培養基 28
貼壁細胞的解離 30
TrypLE. 解離酶 30
貼壁細胞的傳代 . 31
所需材料 31
貼壁細胞傳代流程 . 31
貼壁昆蟲細胞傳代的注意事項 32
細胞培養基本知識 | iii
目錄
懸浮細胞的傳代 . 33
懸浮細胞的傳代 33
懸浮培養容器 . 33
所需材料 34
懸浮細胞傳代流程 . 34
懸浮昆蟲細胞傳代的注意事項 36
細胞的冷凍 . 37
凍存 37
細胞凍存指導原則 . 37
凍存培養基 38
所需材料 38
培養細胞凍存方案 . 39
冷凍細胞的解凍 . 40
細胞解凍指導原則 . 40
所需材料40
冷凍細胞解凍方案 . 40
支持技術方案 . 41
利用血球計數器進行細胞計數 41
臺盼藍拒染法 . 42
濃縮細胞42
附錄 43
疑難解析 43
細胞培養產品 . 44
細胞系 . 44
哺乳動物細胞培養基 . 45
昆蟲細胞培養基 46
細胞培養用血清產品 . 46
細胞培養用實驗試劑 . 47
抗生素和抗真菌劑 . 48
細胞培養用輔助產品 . 49
生長因子和純化蛋白 . 49
轉染和選擇 50
轉染試劑 51
其他資源 52
哺乳動物細胞和昆蟲細胞培養 52
細胞與組織分析 52
轉染選擇工具 . 52
安全數據表 52
分析證書 52
53
iv | 細胞培