蛋白質分子中含有許多肽鍵，與雙縮脲結構相同，在堿性溶液中能與銅離子結合紫色的化合物（稱雙縮脲反應）在一定濃度范圍，顏色的深淺與蛋白質濃度生正比，故可用比色法測定蛋白質的含量，含有兩個以上的肽鍵物質才有反應，故氨基酸無此反應。雙縮脲反應是指具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物在堿性條件下與Cu2+反應,生成紅紫色的絡合物.所有的蛋白質均有此顯色反應.雙縮脲試劑就是指能與具有兩個以上肽鍵的化合物發生紅紫色顯色反應的試劑.它是NaOH和CuSO4兩種溶液鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑，發生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質是在堿性環境下的Cu2+與雙縮脲試劑發生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲（H2NOC-NH-CONH2）結構相似的肽鍵，所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發生顏色反應，可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質的存在。配位化合物（coordination compound）簡稱配合物,也叫錯合物、絡合物,為一類具有特征化學結構的化合物,由中心原子或離子（統稱中心原子）和圍繞它的稱為配位體（簡稱配體）的分子或離子,*或部分由配位鍵結合形成. 雙縮脲（NH2CONHCONH2）是兩個分子脲經180℃左右加熱，放出一個分子氨后得到的產物。在強堿性溶液中，雙縮脲與二價銅離子形成紫色絡合物，稱為雙縮脲反應應。凡具有兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鍵，或能夠以一個中間碳原子相連的肽鍵，這類化合物都有雙縮脲反應。此法的優點是較快速 ，不同的蛋白質產生顏色的深淺相近，以及干擾物質少。主要的缺點是靈敏度差，不適合微量蛋白的測定。