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兔ELISA試劑盒的原理是怎樣的?

時間:2016/5/26閱讀:2268
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    一般細胞因子的檢測,都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測,由于因子分子量比力大,一般10幾個KD左右,很容易找到兩個或多個抗原表位。而小分子很難找到兩個不通的表位,也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結(jié)合小分子并固相化。解決方案便是酶標板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標的小分子,然后加樣品,再加不帶標志的檢測抗體,顯色底物。樣品的目標小分子的含量越高,吸光度越低。病原體抗原的定性與定量,評估自己制備的血清抗體的效價等。
   
    兔ELISA試劑盒中封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機會。蛋白和非離子型去污劑。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。兔ELISA試劑盒如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高,或者未正確稀釋,則會導(dǎo)致高背景。固相載體表面有能被此蛋白質(zhì)*覆蓋,兔ELISA試劑盒其后加入的血清標本和酶結(jié)合物,其中的蛋白質(zhì)也會部分地吸附于固相載體表面,zui后產(chǎn)生非特異性顯色而導(dǎo)致本底偏高。

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