肌細(xì)胞分離概述從灌注心臟中分離存活的肌細(xì)胞是許多光學(xué)和/或電生理學(xué)實驗或*培養(yǎng)中的初和關(guān)鍵的步驟。

該系統(tǒng)可用于恒壓或恒流Langendorff制劑。

如果實驗者決定使用更常見的恒定流量隔離，則使用歧管來選擇合適的溶液，然后將其泵 送通過氣泡捕集器并進(jìn)入心臟。

先，使用晶體溶液（Kreb's或Tyrode's）去除血細(xì)胞并穩(wěn)定制劑，然后使用含有EGTA 的溶液去除殘留的鈣。

然后將含有膠原酶和有時其他消化酶的溶液再循環(huán)通過制劑直至心臟變得松弛，表明將細(xì)胞保 持在一起的細(xì)胞間基質(zhì)溶解。

然后將部分消化的組織切成小塊并置于振蕩浴中并進(jìn)行連續(xù)解離處理直至釋放出單個肌 細(xì)胞。

該方案可能需要幾次更換溶液以選擇具有產(chǎn)量和活力的肌細(xì)胞部分，后者通過在臺盼藍(lán)或其他活體染料染 色存在下使用顯微鏡檢查來確定。

為了增加活力，孵育培養(yǎng)基的鈣濃度的階躍變化用于在使用之前將肌細(xì)胞恢復(fù)到正 常的離子環(huán)境。