性做久久久久久坡多野结衣-性做久久久久久久久浪潮-性欲影院-性影院-国产精品线路一线路二-国产精品兄妹在线观看麻豆

 DNA 提取

1. 取材料，加液氮研磨成粉末狀，迅速移入 1.5 ml Eppendorf 管中;
2. 加入 800 μl 的 CTAB 提取緩沖液，混勻(CTAB 在 65℃水浴預熱)，每5min輕輕震蕩幾次，20min后12000 r/min，離心15 min;
3. 小心吸取上清液，加入等體積的酚：氯fang(各 400μl)溶液，混勻，4℃，12000 r/min，離心 10 min;
4. 小心吸取上清液，加入等體積的氯fang，混勻，4℃，12000 r/min，離心 10 min；
5. 重復步驟(4)1-2 次，以蛋白層不出現為止;
6. 取上清，-20℃沉淀 1h，4℃，12000 r/min，離心 10 min;
7. 棄去上清液，用 70%乙醇洗滌沉淀 2 次;
8. 室溫下干燥后(一般干燥 5-15 min)，溶于 30-50 μl DEPC 去離子水中，于-20℃或者-70℃下保存備用。

RNA 提取

樣品處理：

1. 培養細胞：收獲細胞 1-5×107，移入 1.5ml 離心管中，加入 1ml Trizol，混勻，室溫靜置 5min。
2. 組織：取 50-100mg 組織(新鮮或-70℃及液氮中保存的組織均可)置 1.5ml 離心管中，加入 1ml Trizol 充分勻漿，室溫靜置5min。

提取步驟：

1. 加入 0.2ml 氯fang，振蕩 15s，靜置 2min。
2. 4℃離心，12000g×15min，取上清。
3. 加入 0.5ml 異丙醇，將管中液體輕輕混勻，室溫靜置 10min。
4. 4℃離心，12000g×10min，棄上清。
5. 加入 1ml 75%乙醇，輕輕洗滌沉淀。4℃，7500g×5min，棄上清。
6. 晾干，加入適量的 DEPC H2O 溶解(65℃促溶 10-15min)。