DEAE-Sephadex A-50

柱層析純化免疫球蛋白原理

DEAE-sephadexA-50

柱層析是離子交換層析的一種。

(四) 注意事項

1.柱的選擇：從理論上說，只要柱足夠長，就得獲得理想的分辨率，但由于層析柱流速同壓力梯度有關，柱長增加使流速減慢，峰變寬，分辨率降低。柱的直徑增加，使液體流動的不均勻性增加，分辨率明顯下降。

2.純化過程必須嚴格控制脫緩沖液的PH及離子強度。樣品與A-50凝膠必須用洗脫緩沖液*平衡后，才能進行柱層析。

3.所裝的柱床必須表面平整，無溝流及氣泡，否則應重裝。

4.洗脫過程中應嚴格控制流速，且勿過快。

5.上樣的體積要小，濃度不宜過高。

6.加樣及整個洗脫過程中，嚴防柱面變干。