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剛果紅染色法

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剛果紅染色法
剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅——纖維素的復(fù)合物便沒法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌

剛果紅染色法

服務(wù)原理:

剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅——纖維素的復(fù)合物便沒法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌

服務(wù)方法:

方法一、先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)

在長出菌落的培養(yǎng)基上,覆蓋質(zhì)量濃度為1 mg/mI。的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物質(zhì)的量濃度為l mol/l的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCl溶液,此時(shí),產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會(huì)出現(xiàn)透明圈。

(加NaCl的原因:剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物,但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)纖維素酶,能分解這個(gè)多糖底物成為寡糖,這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了,氯化鈉就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大小不一的透明圈,大的透明圈分解纖維素的能力就強(qiáng))

方法二、在倒平板時(shí)就加入剛果紅

配制質(zhì)量濃度為10 mg/mI的CR溶液,滅菌后,按照每200 mI。培養(yǎng)基加入1 mI。的比例加入CR溶液,混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長出茵落后,產(chǎn)生纖維素酶菌落圍將會(huì)出現(xiàn)明顯的透明圈。

 

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