BRL大鼠肝細胞系
BRL大鼠肝細胞系作為源自大鼠肝臟實質組織的正常肝細胞模型,因保留肝細胞的物質代謝功能及解毒特性,在肝臟生理功能調控、肝損傷修復機制及肝臟疾病病理研究中具有重要價值,成為探究肝細胞生理功能及相關疾病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠正常肝臟的實質組織,經原代培養和純化獲得。細胞形態呈多邊形,胞體大小均勻(直徑約 20-25μm),胞質豐富且呈嗜酸性,可見較多的線粒體和內質網,約 20% 細胞可見雙核現象,細胞核呈圓形或橢圓形,位于細胞中央,核仁清晰。生長方式為貼壁生長,呈不規則單層排列,具有一定的接觸抑制現象,傳代后 24 小時貼壁率達 93%。核心參數表現出正常肝細胞特征:倍增時間約 72 小時,連續傳代 18 次后仍保持穩定的生物學特性;表面標志物表達du特,白蛋白(Albumin)陽性率達 96%,肝細胞特異性標志物細胞角蛋白 18(CK18)陽性率 94%,細胞色素 P450 家族成員 CYP3A 陽性率 88%;具有正常的二倍體核型(染色體數 42 條),無染色體畸變;能合成和分泌白蛋白,基礎分泌量達 45μg/mL;具有糖原合成功能,過碘酸 - 希夫反應(PAS)陽性率達 85%;尿素合成量達 30μmol/(24h?10?細胞);無微生物污染,細胞純度達 97%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在肝臟代謝研究中,BRL 細胞經胰島素處理 48 小時后,糖原合成量增加 60%,葡萄糖激酶活性提升 55%,可模擬胰島素對肝細胞糖代謝的調控作用,為解析肝臟糖代謝機制提供理想模型。
在肝損傷修復研究方面,該細胞經四氯化碳(CCl?)處理后,丙an酸轉氨酶(ALT)釋放量增加 4.2 倍,活性氧(ROS)水平提升 65%,凋亡率達 35%;而經肝細胞生長因子(HGF)處理后,細胞存活率提升 45%,增殖活性增加 50%,可模擬化學性肝損傷及修復過程,適用于探究肝損傷修復的分子機制。
肝臟疾病研究領域,該細胞經脂多糖(LPS)處理后,炎癥因子 TNF-α 分泌量增加 4.8 倍,IL-6 表達量提升 4.2 倍, toll 樣受體 4(TLR4)表達量增加 3.5 倍,能很好地模擬肝炎狀態下肝細胞的炎癥反應,為探究病毒性肝炎、脂肪肝等疾病的發病機制提供實驗基礎。此外,該細胞與肝星狀細胞共培養時,肝星狀細胞的 α- 平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達量增加 3.2 倍,可用于探究肝細胞 - 星狀細胞相互作用在肝纖維化中的調控機制。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/Ham's F-12 培養基,添加 2mM 谷an酰胺、10μg/mL 胰島素及 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2-3 天更換一次,以維持細胞的代謝功能。傳代時,用 PBS 沖洗細胞 2 次,加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 混合液,37℃孵育 8-10 分鐘,待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落,傳代比例為 1:2-1:3,每 6-7 天傳代一次,避免過度傳代導致功能下降。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,細胞濃度調整為 2×10?個 /ml,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇存活率達 85% 以上,3-4 代內可恢復正常的生長和代謝功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物且排列正常后進行實驗。該細胞系僅限科研使用,操作時需避免頻繁更換培養條件,以防影響其代謝活性。
BRL 大鼠肝細胞系以其穩定的肝細胞特性、完整的代謝功能及典型的肝臟生理活性,在肝臟生物學研究與肝臟疾病機制探索中發揮著重要作用,為揭示肝臟疾病的發病機制和開發保肝藥物提供了可靠的細胞模型。
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