RNTEC/HL-040大鼠正常甲狀腺上皮細胞系
RNTEC/HL-040大鼠正常甲狀腺上皮細胞系作為源自大鼠甲狀腺濾泡的上皮細胞模型,因保留甲狀腺te有的激素合成功能、碘攝取能力及內分泌調節特性,在甲狀腺生理功能解析、甲狀腺疾病機制及內分泌調控研究中具有重要價值,成為探究甲狀腺濾泡上皮細胞功能及相關疾病的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠甲狀腺濾泡組織,經原代培養和純化獲得。細胞形態呈典型上皮樣,多為立方形或多邊形,胞體大小均勻(直徑約 15-18μm),胞質豐富且呈嗜酸性,可見大量的粗面內質網和高爾基體,約 20% 細胞可見細小的胞質突起,細胞核呈圓形或橢圓形,位于細胞中央,核仁清晰。生長方式為貼壁生長,呈單層濾泡樣聚集排列,接觸抑制明顯,傳代后 24 小時貼壁率達 95%。核心參數符合正常甲狀腺上皮細胞特征:倍增時間約 72 小時,連續傳代 20 次后仍保持穩定的生物學特性;表面標志物表達du特,甲狀腺球蛋白(Tg)陽性率達 96%,甲狀腺過氧化物酶(TPO)陽性率 94%,促甲狀腺素受體(TSHR)陽性率 92%;具有正常的二倍體核型(染色體數 42 條),無染色體畸變;激素合成功能活躍,甲狀腺素(T4)基礎分泌量達 45ng/mL,三碘甲狀腺原氨酸(T3)分泌量達 12ng/mL;碘攝取能力突出,125I 攝取率達 35%,受促甲狀腺素(TSH)刺激后攝取率提升至 65%;無微生物污染,細胞純度達 97%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在甲狀腺激素合成機制研究中,RNTEC/HL-040 細胞經促甲狀腺素(10mU/mL)處理 48 小時后,甲狀腺球蛋白 mRNA 表達量增加 4.2 倍,甲狀腺過氧化物酶活性提升 58%,T4 分泌量增加 3.5 倍,可模擬垂體 - 甲狀腺軸對激素合成的調控過程,為解析甲狀腺激素合成的分子機制提供理想模型。
甲狀腺自身免疫疾病研究方面,該細胞經甲狀腺自身抗體(抗 Tg 抗體)處理后,細胞凋亡率達 38%,炎癥因子 IL-6 分泌量增加 4.8 倍,補體 C3 沉積量提升 60%;而經免疫抑制劑處理后,細胞存活率提升 50%,炎癥反應強度下降 55%,可模擬橋本甲狀腺炎中的甲狀腺上皮損傷過程,適用于探究自身免疫性甲狀腺疾病的發病機制。
內分泌紊亂研究領域,該細胞經高碘環境(碘離子 100μmol/L)處理后,鈉碘轉運體(NIS)表達量下降 55%,碘攝取率降低 60%,T3 分泌量下降 40%,能很好地模擬碘過量引起的甲狀腺功能異常,為探究碘代謝紊亂相關甲狀腺疾病的發病機制提供實驗基礎。此外,該細胞與甲狀腺間質細胞共培養時,間質細胞的成纖維生長因子(FGF)分泌量增加 3 倍,可用于探究濾泡上皮 - 間質相互作用在甲狀腺增生中的調控機制。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 F-12K 培養基,添加 1mU/mL 促甲狀腺素(TSH)、5μg/mL 胰島素及 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2 天更換一次,以維持細胞的激素合成功能。傳代時,用 PBS 沖洗細胞 2 次,加入專用上皮細胞解離液,37℃孵育 10-12 分鐘,待細胞濾泡結構松散后輕輕吹打使細胞脫落,傳代比例為 1:2-1:3,每 7-8 天傳代一次,避免過度傳代導致功能下降。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,細胞濃度調整為 2×10?個 /ml,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇存活率達 85% 以上,3-4 代內可恢復正常的生長和激素分泌功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物且濾泡樣結構完整后進行實驗。該細胞系僅限科研使用,操作時需避免頻繁更換 TSH 濃度,以防影響甲狀腺功能穩定性。
RNTEC/HL-040 大鼠正常甲狀腺上皮細胞系以其穩定的甲狀腺上皮特性、完整的激素合成功能及典型的內分泌應答能力,在甲狀腺生物學研究與內分泌疾病機制探索中發揮著重要作用,為揭示甲狀腺疾病的發病機制和開發甲狀腺疾病治療藥物提供了可靠的細胞模型。
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