INS1大鼠胰島細胞瘤細胞系
INS1大鼠胰島細胞瘤細胞系作為從大鼠胰島 β 細胞瘤中分離建立的細胞模型,因能穩定分泌胰島素且對葡萄糖刺激有良好反應,在糖尿病發病機制、胰島 β 細胞功能調控及相關藥物研發領域應用廣泛,是研究胰島 β 細胞生理與病理變化的重要工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源于大鼠自發性胰島細胞瘤,經原代培養和篩選獲得。在顯微鏡下,細胞呈上皮樣形態,多為多邊形或短梭形,胞質豐富,部分細胞內可見細小的分泌顆粒,約 10%~15% 的細胞會聚集形成類似胰島的細胞團。其生長方式為貼壁生長,傳代后 24 小時貼壁率可達 85% 以上,生長狀態穩定。
核心特性表現顯著:倍增時間約為 72 小時,連續傳代 40 次后仍能保持較穩定的生物學特性;胰島 β 細胞特異性標志物表達明顯,胰島素、葡萄糖轉運蛋白 2(GLUT2)免疫熒光染色陽性率分別達 90% 和 88%,而胰高血糖素等其他胰島細胞標志物表達陰性;在葡萄糖刺激下,胰島素分泌功能突出,當葡萄糖濃度從 5.6mM 升至 16.7mM 時,胰島素釋放量可增加 4~5 倍,這一特性使其在相關研究中具有不可替代的優勢;細胞無細菌、真菌、支原體等污染,純度達 95% 以上,確保實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在糖尿病機制研究中,INS1 細胞是理想的模型。將其置于高糖(25mM)環境中培養 1 周,細胞凋亡率會上升 30%,胰島素分泌量下降 25%,同時參與胰島素信號傳導的關鍵分子磷酸化水平顯著降低,能很好地模擬高糖誘導的胰島 β 細胞功能損傷過程,為探究糖尿病中 β 細胞功能衰竭的機制提供有力支持。
在藥物篩選方面,該細胞對多種影響胰島功能的藥物反應敏感。例如,經 GLP-1 類似物處理后,細胞胰島素分泌量可增加 30%,凋亡率下降 20%,可用于評估藥物對胰島 β 細胞的保護作用及療效。
此外,通過構建 INS1 細胞與免疫細胞的共培養體系,能研究免疫因素對胰島 β 細胞的影響,為自身免疫性糖尿病的發病機制研究提供新的視角。
培養與保存規范:培養 INS1 細胞推薦使用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養基,同時添加 1mM 丙酮酸鈉、50μM β- 巰基乙醇和 1% 青mei素 - 鏈mei素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?的飽和濕度培養箱。培養基需每 2~3 天更換一次,以保證細胞獲得充足營養。
傳代時,先用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液處理,37℃孵育 3~5 分鐘,待細胞間隙增大后,加入含血清的培養基終止消化,傳代比例為 1:2~1:3,每 5~6 天傳代一次,避免細胞過度融合影響功能。
凍存時,凍存液采用培養基、胎牛血清和 DMSO 按 7:2:1 的比例配制,經梯度降溫后放入液氮中保存,復蘇后細胞存活率可達 80% 以上,且 2~3 代后即可恢復正常的生長和分泌功能。運輸過程中采用 T-25 培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞狀態,確認無異常后方可進行實驗。該細胞系僅用于科研,使用時需遵守相關實驗規范。
INS1 大鼠胰島細胞瘤細胞系憑借其穩定的胰島素分泌功能和對葡萄糖的敏感反應,在糖尿病研究及藥物開發中發揮著重要作用,為深入探索胰島 β 細胞的生理病理機制提供了可靠的實驗平臺。
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