RNEEC/HL-036大鼠正常子宮內(nèi)膜細(xì)胞系
RNEEC/HL-036大鼠正常子宮內(nèi)膜細(xì)胞系作為源自大鼠子宮內(nèi)膜組織的正常上皮細(xì)胞模型，因保留子宮內(nèi)膜的周期性增殖分化特性及激素響應(yīng)功能，在子宮內(nèi)膜周期性變化機(jī)制、子宮修復(fù)及相關(guān)婦科疾病研究中具有重要價(jià)值，成為探究子宮內(nèi)膜生理功能及相關(guān)疾病的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)工具。
細(xì)胞特性與來(lái)源背景：該細(xì)胞系源自大鼠子宮內(nèi)膜增殖期組織，經(jīng)原代培養(yǎng)和純化獲得。細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣，多為立方形或短柱狀，胞體大小均勻（直徑約 15-20μm），胞質(zhì)豐富且呈嗜酸性，可見(jiàn)細(xì)小的分泌顆粒，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，位于細(xì)胞基底部，核仁清晰。生長(zhǎng)方式為貼壁生長(zhǎng)，呈單層鋪路石樣排列，具有明顯的接觸抑制現(xiàn)象，傳代后 24 小時(shí)貼壁率達(dá) 92%。核心參數(shù)表現(xiàn)出正常子宮內(nèi)膜細(xì)胞特征：倍增時(shí)間約 68 小時(shí)，連續(xù)傳代 18 次后仍保持穩(wěn)定的生物學(xué)特性；表面標(biāo)志物表達(dá)du特，細(xì)胞角蛋白 19（CK19）陽(yáng)性率達(dá) 96%，上皮細(xì)胞黏附分子（EpCAM）陽(yáng)性率 94%，雌激素受體 α（ERα）陽(yáng)性率 92%，孕激素受體（PR）陽(yáng)性率 89%；具有正常的二倍體核型（染色體數(shù) 42 條），無(wú)染色體畸變；能分泌層粘連蛋白，基礎(chǔ)分泌量達(dá) 50ng/mL，在雌激素刺激下分泌量可提升 2.3 倍；無(wú)微生物污染，細(xì)胞純度達(dá) 97%，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價(jià)值：在子宮內(nèi)膜周期性變化研究中，RNEEC/HL-036 細(xì)胞經(jīng)雌激素處理 5 天后，增殖活性提升 55%，Ki67 陽(yáng)性率增加至 48%；再經(jīng)孕激素處理 7 天后，細(xì)胞出現(xiàn)分泌期特征，糖原顆粒含量增加 3.2 倍，可模擬子宮內(nèi)膜從增殖期向分泌期的轉(zhuǎn)化過(guò)程，為解析激素調(diào)控子宮內(nèi)膜周期的機(jī)制提供理想模型。
在子宮內(nèi)膜修復(fù)研究方面，該細(xì)胞經(jīng)表皮生長(zhǎng)因子（EGF）處理 48 小時(shí)后，遷移速率增加 60%，Ⅰ 型膠原蛋白分泌量提升 45%，創(chuàng)面愈合率達(dá) 78%，可模擬子宮內(nèi)膜損傷后的修復(fù)過(guò)程，適用于探究子宮內(nèi)膜修復(fù)的分子機(jī)制。
婦科疾病研究領(lǐng)域，該細(xì)胞在高濃度孕激素處理下，凋亡率增加 35%，ERα 和 PR 表達(dá)量分別下降 40% 和 45%，可模擬孕激素過(guò)多導(dǎo)致的子宮nei膜萎suo現(xiàn)象，為探究子宮內(nèi)膜異位癥、閉經(jīng)等疾病的發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。此外，該細(xì)胞與子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，間質(zhì)細(xì)胞的 α- 平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)量增加 2.8 倍，可用于探究上皮 - 間質(zhì)相互作用在子宮內(nèi)膜蛻膜化中的調(diào)控機(jī)制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 12% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基，添加 10ng/mL 表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、1% 胰島素 - 轉(zhuǎn)鐵蛋白 - 硒混合液及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2-3 天更換一次，以維持細(xì)胞的正常特性。傳代時(shí)，用 PBS 沖洗細(xì)胞 2 次，加入專(zhuān)用細(xì)胞解離液，37℃孵育 10-12 分鐘，待細(xì)胞間隙增大后輕輕吹打使細(xì)胞脫落，傳代比例為 1:2-1:3，每 6-7 天傳代一次，避免過(guò)度傳代導(dǎo)致激素響應(yīng)能力下降。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細(xì)胞濃度調(diào)整為 2.5×10?個(gè) /ml，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時(shí)→-80℃過(guò)夜→液氮保存）后，復(fù)蘇存活率達(dá) 86% 以上，3-4 代內(nèi)可恢復(fù)正常的生長(zhǎng)和激素響應(yīng)功能。運(yùn)輸采用干冰冷凍運(yùn)輸或培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運(yùn)輸，收到細(xì)胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時(shí)，更換培養(yǎng)基后觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)，確認(rèn)無(wú)異常漂浮物且排列整齊后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞系僅限科研使用，操作時(shí)需避免頻繁更換培養(yǎng)條件，以防影響其周期性特性。
RNEEC/HL-036 大鼠正常子宮內(nèi)膜細(xì)胞系以其穩(wěn)定的子宮內(nèi)膜特性、顯著的激素響應(yīng)能力及良好的增殖分化潛能，在子宮內(nèi)膜生物學(xué)研究與婦科疾病機(jī)制探索中發(fā)揮著重要作用，為揭示子宮內(nèi)膜相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制和開(kāi)發(fā)新型治療藥物提供了可靠的細(xì)胞模型。
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