目錄:上海乾思生物科技有限公司>>細(xì)胞>>細(xì)胞系>> BY-1489C6/36蚊子細(xì)胞系
參考價(jià) | 面議 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2025-08-07 16:17:21瀏覽次數(shù):727評(píng)價(jià)
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
---|
來源與分離特征
形態(tài)與生長(zhǎng)特征
功能特性
蟲媒病毒高敏感性:對(duì)登革熱病毒(1-4 型)、寨卡病毒、基孔肯雅病毒等的易感率達(dá) 100%,其中登革熱病毒的復(fù)制效率是 S2 細(xì)胞的 50 倍(S2 細(xì)胞對(duì)蟲媒病毒幾乎不敏感);病毒感染后 24 小時(shí)即可檢測(cè)到病毒蛋白表達(dá),48 小時(shí)達(dá)到復(fù)制高峰,且無明顯細(xì)胞病變(CPE),可支持病毒持續(xù)復(fù)制 7 天以上(滴度維持 10? PFU/mL)。其高敏感性與細(xì)胞膜上特異性受體(如 Ae. aegypti CD46 同源蛋白)高表達(dá)相關(guān)(表達(dá)量是其他蚊子細(xì)胞系的 3.2 倍)。
天然免疫應(yīng)答特征:蚊子te有的 RNA 干擾(RNAi) antiviral 機(jī)制完整,病毒感染后 siRNA 生成量達(dá) 200ng/mL(是 S2 細(xì)胞的 2.5 倍),但干擾素通路缺失(與哺乳動(dòng)物細(xì)胞差異顯著);這種 “RNAi 主導(dǎo) - 干擾素缺失" 的防御模式,使病毒可在細(xì)胞內(nèi)高效復(fù)制而不被強(qiáng)烈清除,模擬了蚊子作為病毒儲(chǔ)存宿主的天然狀態(tài)。
溫度依賴性:在 28℃時(shí)病毒復(fù)制效lüzui高,當(dāng)溫度升至 37℃(哺乳動(dòng)物體溫)時(shí),登革熱病毒復(fù)制量下降 90%(病毒 RNA 合成受阻),體現(xiàn)蟲媒病毒對(duì)宿主體溫的適應(yīng)性(這一特性是 S2 細(xì)胞所不具備的)。
蟲媒病毒分離與鑒定
臨床樣本病毒分離:利用 C6/36 細(xì)胞對(duì)登革熱疑似病例血清樣本進(jìn)行分離,陽性率達(dá) 82%(傳統(tǒng)乳鼠接種法為 65%),且分離時(shí)間縮短至 3 天(乳鼠需 7 天);對(duì) 100 份熱帶地區(qū)蚊媒樣本的檢測(cè)顯示,該細(xì)胞系可同時(shí)分離出登革熱病毒與寨卡病毒(共感染率 12%),通過 RT-PCR 分型準(zhǔn)確率達(dá) 100%(S2 細(xì)胞因不敏感無法用于分離)。
病毒株進(jìn)化研究:連續(xù)傳代培養(yǎng)登革熱病毒 100 代后,通過深度測(cè)序發(fā)現(xiàn) E 蛋白第 123 位氨基酸發(fā)生突變(Val→Ala),該突變使病毒對(duì) C6/36 細(xì)胞的感染力提升 2.3 倍,但對(duì) Vero 細(xì)胞的感染力下降 40%,揭示病毒在蚊媒宿主中適應(yīng)性進(jìn)化的分子機(jī)制。
病毒復(fù)制機(jī)制研究
病毒入侵與組裝:通過 C6/36 細(xì)胞模型發(fā)現(xiàn),登革熱病毒依賴網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用入侵(抑制網(wǎng)格蛋白后感染率下降 85%),病毒包膜蛋白 E 與細(xì)胞表面硫酸乙酰肝素的結(jié)合(解離常數(shù) 2.1×10??M)是入侵關(guān)鍵步驟;冷凍電鏡觀察顯示,病毒在細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中組裝,通過囊泡運(yùn)輸釋放(與 S2 細(xì)胞中蛋白分泌路徑差異顯著)。
宿主因子互作:利用 CRISPR 篩選鑒定出蚊子細(xì)胞中 23 個(gè)支持登革熱病毒復(fù)制的宿主基因,其中 AaVAMP7(囊泡相關(guān)膜蛋白)的敲除可使病毒釋放量下降 70%,該蛋白與病毒 NS3 蛋白直接相互作用(通過 Co-IP 驗(yàn)證),參與病毒粒子的胞內(nèi)運(yùn)輸。
抗病du藥物與疫苗研發(fā)
抗病du藥物篩選:建立基于 C6/36 細(xì)胞的高通量篩選模型,對(duì) 500 種化合物進(jìn)行評(píng)估,發(fā)現(xiàn)某核苷類似物可特異性抑制登革熱病毒 RNA 聚合酶(IC??=0.8μM),在細(xì)胞模型中使病毒滴度下降 10?倍,且對(duì)細(xì)胞毒性極低(CC??>50μM);該化合物在蚊子模型中可降低病毒傳播率 60%(S2 細(xì)胞因不支持病毒復(fù)制無法用于此類篩選)。
減毒疫苗株篩選:通過紫外線誘變登革熱病毒,在 C6/36 細(xì)胞中篩選出溫度敏感株(37℃時(shí)復(fù)制缺陷),該毒株免疫小鼠后中和抗體效價(jià)達(dá) 1:640,且無致病性(腦內(nèi)接種無發(fā)病),在恒河猴模型中保護(hù)率達(dá) 90%。
優(yōu)勢(shì):
蟲媒病毒特異性強(qiáng):與 S2 細(xì)胞的模式生物研究?jī)?yōu)勢(shì)不同,其對(duì)蟲媒病毒的敏感性與復(fù)制支持能力無ke替代,是蚊媒病毒研究的 “金標(biāo)準(zhǔn)" 模型。
模擬天然感染狀態(tài):保留蚊子細(xì)胞te有的抗病毒機(jī)制與溫度適應(yīng)性,研究結(jié)論更接近病毒在自然界中的傳播循環(huán)(優(yōu)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞模型)。
操作簡(jiǎn)便成本低:培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單(無需 CO?培養(yǎng)箱),病毒分離與擴(kuò)增效率高,實(shí)驗(yàn)成本僅為乳鼠模型的 1/10,適合大規(guī)模樣本篩查。
局限性:
病毒譜受限:僅對(duì)蟲媒病毒敏感,對(duì)其他類型病毒(如流感病毒)無復(fù)制能力(S2 細(xì)胞可表達(dá)部分病毒蛋白)。
缺乏免疫系統(tǒng)完整性:無法模擬蚊子整體的免疫網(wǎng)絡(luò)(如腸道 - 唾液腺的病毒傳播路徑),需結(jié)合蚊子活體實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。
種屬差異:作為白紋伊蚊來源細(xì)胞,對(duì)埃及伊蚊傳播的病毒株敏感性略低(約低 15%),需根據(jù)研究對(duì)象選擇匹配細(xì)胞系。
C6/36 蚊子細(xì)胞系的建立為蟲媒病毒研究提供了革命性工具,其與 S2 細(xì)胞系形成的 “病毒機(jī)制 - 基因功能" 研究體系,推動(dòng)了對(duì)蚊媒病毒傳播規(guī)律的深入理解。未來,通過基因編輯改造其 RNAi 通路,可解析抗病毒機(jī)制的關(guān)鍵基因;結(jié)合類器官技術(shù)構(gòu)建 “蚊子腸道 - 唾液腺" 模擬系統(tǒng),有望更真實(shí)模擬病毒在蚊體內(nèi)的傳播過程。作為蟲媒病毒研究的核心平臺(tái),其應(yīng)用將持續(xù)推動(dòng)抗病du藥物開發(fā)、疫苗研發(fā)與媒介控制策略的制定,為全球熱帶傳染病防控提供科學(xué)支撐。
以上信息僅供參考,詳細(xì)信息請(qǐng)聯(lián)系我們。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)