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細(xì)胞

原代細(xì)胞

細(xì)胞系

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HCT-15人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系源于男性結(jié)腸腺癌，呈上皮樣形態(tài)，具染色體畸變與關(guān)鍵基因突變，在腫瘤研究及藥物篩選中應(yīng)用廣泛。

詳細(xì)介紹

HCT-15人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系

HCT-15人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系源自男性結(jié)腸腺癌患者的腫瘤組織，于 20 世紀(jì) 70 年代初被成功建立。在顯微鏡下觀察，其細(xì)胞呈現(xiàn)典型的上皮樣形態(tài)，細(xì)胞相互連接，形成緊密的單層或簇狀結(jié)構(gòu)，細(xì)胞大小和形態(tài)存在一定差異，這種異質(zhì)性與人體結(jié)直腸腺癌腫瘤組織的細(xì)胞特征高度相似。其核型為超二倍體，存在多個(gè)染色體畸變，同時(shí)攜帶多種關(guān)鍵基因突變，例如 KRAS 基因突變、p53 通路相關(guān)基因缺失等，這些遺傳特征不僅賦予細(xì)胞惡性增殖的能力，也為腫瘤研究提供了豐富的靶點(diǎn)。

HCT - 15 細(xì)胞的培養(yǎng)需特定且精細(xì)的條件。常用 RPMI - 1640 培養(yǎng)基，添加 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清和 1% 雙抗，以滿(mǎn)足細(xì)胞生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)，維持無(wú)菌環(huán)境。其中，胎牛血清富含細(xì)胞生長(zhǎng)必需的生長(zhǎng)因子、激素、結(jié)合蛋白等物質(zhì)，能有效促進(jìn)細(xì)胞貼壁和增殖；雙抗則防止細(xì)菌和真菌污染，保障細(xì)胞健康生長(zhǎng)。培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% 二氧化碳與 95% 空氣的混合氣體，濕度保持在 70% - 80%。37℃模擬人體體溫，5% 二氧化碳可維持培養(yǎng)基的 pH 穩(wěn)定，適宜的濕度避免培養(yǎng)基過(guò)快蒸發(fā)。細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，當(dāng)匯合度達(dá) 80% - 90% 時(shí)需傳代。傳代使用 0.25％（w/v）胰dan白酶 - 0.53mM EDTA 消化，由于細(xì)胞貼壁較緊，消化時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，約 1 - 2 分鐘。在消化過(guò)程中，需在顯微鏡下密切觀察細(xì)胞形態(tài)變化，當(dāng)細(xì)胞變圓、間隙增大時(shí)，及時(shí)終止消化，避免過(guò)度消化損傷細(xì)胞。傳代比例一般為 1:2 - 1:4 。凍存時(shí)，凍存液采用 90% 胎牛血清加 10% 二甲基亞砜，按 4℃ 10 分鐘、-20℃ 2 小時(shí)、-80℃過(guò)夜后轉(zhuǎn)至液氮的程序保存，每一步降溫都能減少細(xì)胞內(nèi)冰晶形成，保護(hù)細(xì)胞活性。

在科學(xué)研究中，HCT - 15 細(xì)胞系應(yīng)用廣泛。利用該細(xì)胞系構(gòu)建的耐藥模型，如 HCT - 15/5FU 細(xì)胞系，是研究氟尿*啶耐藥機(jī)制的重要工具。研究發(fā)現(xiàn)，HCT - 15/5FU 細(xì)胞的耐藥涉及胸苷酸合成酶上調(diào)、二氫嘧啶脫氫酶活性增強(qiáng)、藥物外排與解毒系統(tǒng)激活等多個(gè)方面。通過(guò)對(duì) HCT - 15 細(xì)胞的研究，不僅能深入探索腫瘤發(fā)生發(fā)展機(jī)制，還能進(jìn)行抗癌藥物篩選、評(píng)估藥物療效。例如，研究人員通過(guò)將新型靶向藥物作用于 HCT - 15 細(xì)胞，觀察細(xì)胞增殖、凋亡情況，判斷藥物對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞的抑制效果，為結(jié)直腸癌的臨床治療提供理論依據(jù)和潛在靶點(diǎn)。

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