NRK正常大鼠腎細胞系
NRK正常大鼠腎細胞系作為保留正常腎臟上皮細胞生物學特性的永生化細胞模型,在腎臟生理功能、腎損傷機制及藥物腎毒性研究中應用廣泛,憑借其穩定模擬正常腎小管上皮細胞功能的特性,成為探究腎臟相關疾病的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠正常腎臟皮質組織,經原代培養及永生化處理建立。細胞形態呈典型上皮樣,多為立方形或多邊形,胞質豐富,可見清晰的細胞邊界,約 12% 細胞呈現雙核現象,細胞核呈圓形,核仁明顯,核質比適中。生長方式為緊密貼壁生長,呈規則的鋪路石樣排列,具有明顯接觸抑制,傳代后 24 小時貼壁率達 95%,顯著高于腫瘤源性腎細胞系。核心參數表現穩定:倍增時間約 60 小時,連續傳代 50 次后仍保持正常二倍體核型(染色體數 42 條);腎小管上皮標志物如細胞角蛋白 18(CK18)、鈉鉀 ATP 酶(Na?/K?-ATPase)免疫熒光染色陽性率達 97%,尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶(UGT)活性維持在原代腎細胞的 85%;無細菌、真菌、支原體及病毒污染,細胞純度達 98%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在腎臟生理功能研究中,NRK 細胞可形成完整的腎小管上皮屏障,跨上皮電阻(TEER)值穩定在 420Ω?cm2 以上,對鈉離子的重吸收能力達原代腎小管細胞的 78%,可模擬正常腎小管的物質轉運功能,為解析腎臟水鹽代謝機制提供理想模型。腎損傷機制研究方面,該細胞在慶da霉素刺激下,24 小時內乳酸脫氫酶(LDH)釋放量增加 3.6 倍,活性氧(ROS)水平上升 4.2 倍,緊密連接蛋白 ZO-1 表達量減少 45%,能很好地模擬藥物性腎損傷的病理過程,助力腎毒性分子機制的探究。藥物篩選領域,該細胞對腎毒性藥物反應敏感,經shun鉑類似物處理后,細胞存活率下降 52%,凋亡相關蛋白 Caspase-3 活性升高 3.8 倍,適用于評估新藥的潛在腎毒性及腎保護藥物的療效。此外,將該細胞與腎系膜細胞共培養,可構建體外腎臟微環境模型,用于研究腎小管 - 系膜細胞間的相互作用。
科研應用價值:在腎臟生理功能研究中,NRK 細胞可形成完整的腎小管上皮屏障,跨上皮電阻(TEER)值穩定在 420Ω?cm2 以上,對鈉離子的重吸收能力達原代腎小管細胞的 78%,可模擬正常腎小管的物質轉運功能,為解析腎臟水鹽代謝機制提供理想模型。腎損傷機制研究方面,該細胞在慶da霉素刺激下,24 小時內乳酸脫氫酶(LDH)釋放量增加 3.6 倍,活性氧(ROS)水平上升 4.2 倍,緊密連接蛋白 ZO-1 表達量減少 45%,能很好地模擬藥物性腎損傷的病理過程,助力腎毒性分子機制的探究。藥物篩選領域,該細胞對腎毒性物質反應敏感,經相關化合物處理后,細胞存活率差異顯著(35%-82%),適用于評估藥物的潛在腎毒性及腎保護藥物的療效。此外,將該細胞與腎系膜細胞共培養,可構建體外腎臟微環境模型,用于研究腎小管 - 系膜細胞間的相互作用。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養基,添加 1% 非必需氨基酸、1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養箱。培養基需每 3 天更換一次,更換時動作輕柔以避免細胞脫落。傳代時采用含 EDTA 的溫和消化液處理,37℃孵育 7-10 分鐘,待細胞間隙增大后加入含血清的培養基終止消化,傳代比例為 1:2-1:3,每 5-6 天傳代一次,維持細胞融合度在 70%-80% 以保持正常功能。凍存液配方為基礎培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清,經程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇細胞存活率達 92% 以上,3-4 代內可恢復正常的物質轉運功能。運輸采用 T-25 培養瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養 24 小時,更換培養基后觀察細胞形態,確認無異常漂浮物后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用,禁止用于臨床診療相關研究。
NRK 正常大鼠腎細胞系以其穩定的正常腎臟細胞功能、完整的代謝酶系統及易于培養的優勢,在腎臟生理與病理研究及藥物研發中發揮著重要作用,為推動腎臟相關領域研究的發展提供了可靠的細胞工具。
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