CT26WT小鼠結腸癌細胞系
CT26WT小鼠結腸癌細胞系源自 BALB/c 小鼠的自發性結腸癌，因保留野生型遺傳背景且成瘤性穩定，成為結直腸癌研究領域的經典模型。其與人類結腸癌在病理特征、分子機制上的高度相似性，使其在腫瘤發生發展、藥物篩選及免yi治療研究中占據重要地位，為基礎研究向臨床轉化搭建了關鍵橋梁。
顯微鏡下觀察，CT26WT 細胞呈貼壁生長態勢，形態以多邊形和短梭形為主，宛如鋪展在培養皿上的 “不規則斑塊"。細胞直徑約 16-22 微米，比正常結腸上皮細胞稍大；胞質豐富，可見少量分泌顆粒，部分細胞內存在脂褐素樣包涵體，這是結腸癌細胞的典型胞質特征；細胞核呈卵圓形或不規則形，核質比約 1:1.5，染色質濃密呈塊狀，核仁明顯且多為 1-2 個，展現出活躍的增殖能力。細胞倍增時間約 22-30 小時，當融合度達到 70%-80% 時需傳代，傳代時用 EDTA 溶液處理后輕柔吹打使細胞脫落，按 1:3-1:5 比例接種，連續培養 60 代仍能保持穩定的腫瘤表型和致瘤性。
培養 CT26WT 細胞需模擬腸道微環境。基礎培養基選用 RPMI 1640，其含有的多種氨基酸和維生素可滿足細胞代謝需求；添加 10% 熱滅活胎牛血清提供生長因子，其中血清中的轉化生長因子 -β（TGF-β）前體對維持細胞的上皮間質轉化特性至關重要。培養環境需嚴格控制在 37℃、5% CO?的恒溫培養箱中，pH 值穩定在 7.2-7.4，通過培養基中的酚紅指示劑可直觀監測酸堿變化。與其他結腸癌細胞系相比，該細胞對營養條件要求較為寬松，但需避免培養基中谷an酰胺降解，建議每 2-3 天更換一次培養基，以保持細胞活力。
在結直腸癌發病機制研究中，CT26WT 細胞系是解析基因突變與腫瘤進展關系的理想工具。其攜帶 K-ras 基因突變 —— 這與人類結直腸癌中常見的激活突變高度一致。實驗顯示，該細胞在體外培養時，Ras/MAPK 信號通路持續激活，ERK1/2 磷酸化水平較正常結腸上皮細胞高 3-4 倍，導致細胞增殖不受控。通過 RNA 干擾技術沉默 K-ras 基因后，細胞的克隆形成能力下降 60%，裸鼠成瘤體積縮小 70%，直接證明 K-ras 突變在結直腸癌發生中的驅動作用。此外，該細胞還存在 APC 基因功能異常，導致 β- 連環蛋白在胞質和細胞核內積累，激活下游靶基因 c-Myc、Cyclin D1 的表達，wan美模擬了人類結直腸癌中 Wnt 信號通路異常激活的典型特征。
在藥物篩選領域，CT26WT 細胞系是評估抗結直腸癌藥物療效的常用模型。其對 5 - 氟尿*啶（5-FU）等經典hua療藥物的敏感性與人類結腸癌組織接近，IC50 值約為 12μM，可通過 MTT 法快速檢測藥物對細胞增殖的抑制率。在篩選新型靶向藥物時，該細胞系能有效反映藥物對特定靶點的作用，例如，使用抗 EGFR 單克隆抗體處理后，細胞表面 EGFR 的磷酸化水平下降 80%，細胞遷移能力降低 50%，為評估 EGFR 抑制劑的療效提供了可靠依據。同時，該細胞系可用于構建荷瘤小鼠模型，通過測量腫瘤體積變化和計算抑瘤率，評估藥物的體內療效，實驗顯示，5-FU 處理可使荷瘤小鼠的腫瘤生長延遲 5-7 天，生存期延長 30% 以上。
在腫瘤免疫研究中，CT26WT 細胞系的免疫原性特征使其成為免yi治療研究的理想模型。該細胞表達多種腫瘤相關抗原，如癌胚抗原（CEA）和熱休克蛋白 70（HSP70），可被免疫系統識別。其荷瘤小鼠模型具有完整的免疫系統，能模擬人類結直腸癌的腫瘤免疫微環境，例如，腫瘤微環境中存在大量調節性 T 細胞（Treg）和 M2 型巨噬細胞，可抑制效應 T 細胞的抗腫瘤活性。在免疫檢查點抑制劑研究中，使用抗 PD-1 抗體處理荷瘤小鼠，可使腫瘤內 CD8?T 細胞浸潤增加 2-3 倍，腫瘤生長抑制率達 50% 以上，這與臨床中部分結直腸癌患者對 PD-1 抑制劑響應的特征高度相似，為免yi治liao機制研究和聯合治療策略探索提供了jue佳模型。
在腫瘤轉移研究中，CT26WT 細胞系因具有穩定的轉移潛能而被廣泛應用。通過尾靜脈注射建立肺轉移模型，可見該細胞在肺部形成轉移性結節，轉移率達 60% 以上，轉移灶的病理特征與人類結腸癌肺轉移相似。研究發現，該細胞高表達基質金屬蛋白酶 - 7（MMP-7），可降解腸黏膜基底膜的 Ⅳ 型膠原蛋白，促進腫瘤細胞侵襲和轉移，抑制 MMP-7 活性可使細胞的侵襲能力下降 45%，肺轉移結節數量減少 50%，為開發抗轉移藥物提供了潛在靶點。
前沿研究中，CT26WT 細胞系的應用持續拓展。在類器官構建中，將其與腸上皮細胞、成纖維細胞共培養，可形成具有腸道組織結構的三維腫瘤模型，更真實地模擬體內腫瘤微環境，用于研究腫瘤細胞與周圍細胞的相互作用；在單細胞測序研究中，解析其異質性亞群，發現高表達 CD44 的細胞亞群具有更強的成瘤能力和耐藥性，為識別結直腸癌干細胞提供了標志物；在基因編輯領域，利用 CRISPR 技術敲入熒光蛋白基因，可實時追蹤腫瘤細胞在體內的轉移路徑，為研究轉移機制和評估抗轉移藥物療效提供可視化工具。
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