HepG2-RHBV人肝癌細胞系
HepG2-RHBV人肝癌細胞系,它以 HepG2 細胞為基礎,通過穩定轉染乙型肝炎病毒(HBV)基因組構建而成,是研究 HBV 感染及相關疾病的重要體外模型。
HepG2 細胞源自人原發性肝癌組織,具備肝癌細胞無限增殖與成瘤的特性,而 HBV 基因組的導入,賦予了它模擬 HBV 感染過程的能力。構建過程通常采用質粒轉染技術,將含有 HBV 全基因組或關鍵復制元件的重組質粒導入 HepG2 細胞,再借助抗生素篩選,獲得穩定表達 HBV 基因的細胞克隆,解決了原代肝細胞培養難題與 HBV 宿主特異性限制。
在生物學特性上,HepG2-RHBV 細胞表現卓yue。它能夠高效表達 HBsAg、HBcAg 等 HBV 病毒蛋白,產生完整的 Dane 顆粒,并在細胞內復制形成 cccDNA。研究人員通過檢測細胞培養上清的病毒抗原、核酸及傳染性顆粒,或分析細胞內 cccDNA 水平,得以深入研究 HBV 的復制周期與調控機制。這種特性使它在抗 HBV 藥物研發中不ke或缺。無論是評估恩ti卡韋等核苷(酸)類似物對 HBV DNA 聚合酶的抑制效果,還是驗證干擾素類藥物對病毒蛋白表達的調控作用,該細胞系都能提供可靠的實驗數據。針對 HBV 進入宿主細胞、cccDNA 形成等環節的新型藥物,也能在 HepG2-RHBV 細胞中完成體外活性驗證。
此外,HepG2-RHBV 細胞為探索 HBV 與宿主細胞相互作用打開了大門。HBV 感染與肝癌發生關聯緊密,借助該細胞系,科研人員可探究 HBV 蛋白對宿主細胞信號通路、基因表達及細胞周期的影響。例如,研究發現 HBx 蛋白能激活 NF-κB 通路,促進細胞炎癥反應和增殖,為揭示 HBV 致肝癌的分子機制提供關鍵線索。
不過,在使用 HepG2-RHBV 細胞系時,需遵循特定要求。其培養需在含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基中,于 37℃、5% CO?培養箱進行,并定期傳代。由于其能產生傳染性 HBV 顆粒,實驗必須在 BSL-2 實驗室開展,操作人員要做好防護。而且該模型與體內真實感染環境存在差異,研究結果需結合動物模型進一步驗證。
隨著生命科學技術發展,HepG2-RHBV 細胞系將與類器官技術、單細胞測序等結合,在攻克 HBV 感染及相關肝病的研究中發揮更大作用,為開發更有效的治療方案提供助力。
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