293T人胚腎細胞系（SV40T基因修飾）
293T人胚腎細胞系（SV40T基因修飾）是由人胚腎 293 細胞經 SV40T 基因修飾而來，憑借其高效的外源基因表達能力和病毒包裝特性，成為生命科學研究領域應用較為廣泛的細胞系之一。該細胞系源于人胚胎腎細胞，1973 年由 Alex van der Eb 首ci通過轉染 5 型腺病毒 DNA 片段獲得 293 細胞，后經 Mario Capecchi 團隊引入 SV40 大 T 抗原基因，成功構建出 293T 細胞，極大提升了細胞的轉染效率與蛋白表達能力。
從細胞生物學特性來看，293T 細胞呈貼壁生長，顯微鏡下呈多邊形或梭形，細胞間連接緊密，具有上皮樣細胞形態(tài)特征。SV40T 抗原的表達賦予其du特優(yōu)勢，該抗原可與宿主細胞內的 DNA 復制起始位點結合，促進外源 DNA 的復制和轉錄，使得 293T 細胞的轉染效率較原始 293 細胞提升數(shù)倍，瞬時轉染效lü最高可達 80% 以上。同時，293T 細胞具備強大的蛋白合成與分泌能力，能夠高效表達包括膜蛋白、分泌蛋白在內的多種重組蛋白，且蛋白修飾加工過程接近人體生理狀態(tài)，產出的蛋白具有良好的生物學活性。此外，293T 細胞對多種病毒載體具有良好的兼容性，是生產慢病毒、腺病毒等基因治療載體的首xuan細胞系，其包裝產生的病毒顆粒滴度高、感染性強，可有效介導基因遞送。
在細胞培養(yǎng)方面，293T 細胞對培養(yǎng)條件要求相對寬松。常用含 10% 胎牛血清（FBS）、1% 雙抗（青mei素 - 鏈mei素）的高糖 DMEM 培養(yǎng)基，高糖環(huán)境可為細胞快速增殖提供充足能量。培養(yǎng)環(huán)境需維持在 37℃、5% CO?的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中，當細胞融合度達到 80% 左右時，按 1:3 - 1:5 的比例進行傳代，傳代周期約為 2 - 3 天。新接種的細胞在 6 - 12 小時內即可完成貼壁，24 小時后便能進入快速增殖階段。需要注意的是，293T 細胞生長速度較快，若不及時傳代，細胞會因密度過大而出現(xiàn)形態(tài)改變、增殖能力下降等問題，且培養(yǎng)過程中需嚴格遵循無菌操作，防止支原體污染，以免影響細胞活性和實驗結果。
憑借卓yue的性能，293T 細胞系在生命科學各領域發(fā)揮著關鍵作用。在基因功能研究中，科研人員通過將目的基因轉染至 293T 細胞，快速探究基因的表達調控機制及生物學功能；在抗體藥物研發(fā)方面，利用 293T 細胞表達重組抗體，可實現(xiàn)高效的抗體生產與優(yōu)化，目前多款上市的單克隆抗體藥物均借助該細胞系完成研發(fā)與生產。在基因治療領域，293T 細胞作為病毒載體生產的 “主力軍"，為 CAR - T 細胞治療、罕見病基因治療等提供了安全有效的載體工具，推動了基因治療技術從實驗室走向臨床應用。不過，在使用 293T 細胞系時，需警惕細胞系的遺傳穩(wěn)定性問題，長期傳代可能導致細胞基因變異，影響實驗結果的一致性，因此實驗前需對細胞系進行 STR 分型鑒定和基因表達譜分析，確保細胞系的質量和實驗數(shù)據(jù)的可靠性。
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