Ehrlich艾氏腹水瘤瘤株細胞系
Ehrlich艾氏腹水瘤瘤株細胞系源自小鼠自發性乳腺癌，經腹腔傳代后形成穩定腹水型腫瘤模型，是保留上皮源性特征和腹腔播散能力的經典惡性腫瘤模型，在腹水瘤形成機制、腹腔微環境適應及抗腫瘤藥物篩選研究中具有重要價值，為解析惡性腹水的產生與發展提供了理想工具。
該細胞系呈現典型的腹水瘤細胞形態與表型特征。顯微鏡下，細胞呈圓形或橢圓形，以懸浮方式大量存在于腹水中，單個或成簇分布，細胞體積中等（直徑 12-18μm），核質比高，細胞核呈圓形，染色質呈細顆粒狀，可見 1-2 個明顯核仁，核分裂象多見（每 10 個高倍視野 8-10 個），胞質豐富，呈嗜堿性，部分細胞胞質內可見細小空泡，電鏡下可見細胞表面有少量微絨毛，胞質內含有較多游離核糖體，符合快速增殖細胞的超微結構特點。免疫表型分析顯示，細胞高表達上皮細胞標志物細胞角蛋白 18（CK18）和上皮細胞黏附分子（EpCAM），流式細胞術檢測陽性率分別達 90% 和 85%，同時表達腫瘤增殖相關抗原 Ki-67（陽性率 80%），證實其上皮源性惡性腫瘤的屬性，而間葉組織標志物 vimentin 表達陰性，與原發乳腺癌的表型特征一致。
體外培養體系中，Ehrlich 細胞展現出旺盛的增殖能力與懸浮生長特性。最適培養條件為含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養基，在 37℃、5% CO?環境下，傳代周期約 48 小時，對數生長期細胞活力達 95% 以上，倍增時間約 24 小時，顯著快于實體瘤細胞系。其顯著特點是在體外可維持腹水瘤細胞的懸浮生長狀態，無需貼壁支持，細胞懸浮密度可達 1×10?個 /mL 以上，且不易聚集成團，這種特性與其低表達細胞間黏附分子 E - 鈣粘蛋白相關（表達量僅為正常乳腺上皮細胞的 30%）。軟瓊脂克隆形成率達 50%，克隆形態呈圓形，邊緣整齊，反映其高度惡性的克隆形成能力。凍存復蘇性能優異，液氮凍存后復蘇存活率超 90%，連續傳代 50 次后，CK18 表達及增殖能力無明顯衰減，保證實驗的穩定性與可重復性。
Ehrlich 細胞的核心價值體現在其對惡性腹水形成過程的精準模擬。在動物模型中，將 1×10?個細胞腹腔注射至昆明小鼠，5 天即可產生淡黃色腹水，10 天腹水量達 5-8mL，15 天腹水內腫瘤細胞濃度達 5×10?個 /mL 以上，成瘤率 100%，病理檢查顯示腹水內大量圓形腫瘤細胞，伴有少量纖維素滲出和巨噬細胞浸潤，與人類惡性腹水的成分特征高度一致。通過熒光標記追蹤發現，腫瘤細胞首先附著于腹膜間皮細胞表面，分泌基質金屬蛋白酶 - 2（MMP-2）破壞腹膜屏障，該酶活性較實體瘤細胞高 4 倍，MMP-2 抑制劑處理可使腹水量減少 60%，證實其在腹水形成中的關鍵作用。
在發病機制研究中，該細胞系揭示了腹水瘤te有的分子異常?；蚍治鲲@示，細胞存在 p53 基因的點突變，導致其抑癌功能喪失，Western blot 檢測顯示突變型 p53 蛋白表達量較正常乳腺上皮細胞高 6 倍，下游靶基因 p21 表達下調 50%，使細胞周期失控，S 期細胞比例增加 30%。同時，細胞中 PI3K/Akt 信號通路異常激活，磷酸化 Akt（p-Akt）水平較正常細胞高 5 倍，可促進血管內皮生長因子（VEGF）的分泌，VEGF 是誘導腹水產生的重要因子，Ehrlich 細胞分泌的 VEGF 量是實體瘤細胞的 3 倍，抗 VEGF 抗體處理可使腹水量減少 55%。
在腹腔轉移機制研究中，Ehrlich 細胞展現出廣泛的腹腔內播散特性。動物實驗顯示，腹腔接種后 15 天，腫瘤細胞可廣泛種植于腹膜、大網膜、腸系膜及腹腔臟器表面，形成多發性小結節，其中大網膜種植率達 100%，這種種植轉移特性與細胞高表達整合素 α5β1 相關，該整合素可與腹膜基質中的纖維連接蛋白結合，流式細胞術檢測顯示其結合率達 60%，整合素拮抗劑處理可使腹腔種植結節減少 70%。體外遷移實驗顯示，細胞對腹膜間皮細胞分泌的趨化因子 CCL2 有強烈趨化反應，遷移能力是無趨化因子組的 2.5 倍，CCL2 中和抗體可抑制這種遷移。
在藥物篩選應用中，Ehrlich 細胞是評估抗腹水瘤藥物的經典模型。體外藥敏實驗顯示，細胞對多種hua療藥物敏感，5 - 氟尿*啶的半數抑制濃度（IC50）約 0.5μM，藥物處理后細胞凋亡率達 50%，Caspase-3 活性上調 4 倍。體內實驗證實，腹腔注射 5 - 氟尿*啶可使小鼠腹水量減少 70%，腹水內腫瘤細胞濃度下降 80%，生存期延長 40%。由于其腹水模型的特點，特別適合評估腹腔局部用藥的療效，某新型腹腔緩釋hua療制劑對 Ehrlich 腹水瘤的抑制率達 85%，顯著優于靜脈給藥（抑制率 55%），證實腹腔局部治療的優勢。
在腹腔微環境適應機制研究中，Ehrlich 細胞展現出對低氧、低營養腹腔環境的du特適應能力。在缺氧條件（2% O?）下，細胞缺氧誘導因子 HIF-1α 表達上調，可激活糖酵解相關基因（如 GLUT1、LDHA）的表達，使細胞在缺氧環境下的存活率達 90%（正常細胞僅 50%），糖酵解產物乳酸的分泌增加，導致腹水 pH 值降至 6.8 左右，這種酸性環境可進一步促進腫瘤細胞的侵襲。與腹腔巨噬細胞共培養時，可誘導巨噬細胞分泌 IL-6，反過來促進 Ehrlich 細胞的增殖，形成 “腫瘤 - 免疫細胞" 的惡性循環，IL-6 中和抗體處理可使細胞增殖率下降 45%。
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