W6/32小鼠雜交瘤細胞系
W6/32小鼠雜交瘤細胞系是免疫學與臨床診斷領域的重要工具,因能穩定分泌抗人 HLA-ABC 抗原的單克隆抗體,在組織相容性研究、免疫檢測及移植醫學中發揮著關鍵作用。
來源與背景:該細胞系源自 Balb/c 小鼠的 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合產物。通過用人外周血淋巴細胞免疫小鼠,獲取能產生抗 HLA-ABC 抗體的 B 淋巴細胞,再與骨髓瘤細胞融合,經篩選克隆得到 W6/32 細胞系。其融合兼顧了 B 淋巴細胞的抗體分泌能力和骨髓瘤細胞的無限增殖特性,為持續獲取特異性單克隆抗體提供了穩定來源,是最早建立的抗 HLA-ABC 單抗細胞系之一。
細胞特性:形態上呈圓形或橢圓形,兼具 B 淋巴細胞和骨髓瘤細胞的形態特征,細胞核大而明顯,細胞質豐富,貼壁生長與懸浮生長并存,以貼壁生長為主,生長狀態穩定。核心特性是穩定分泌高特異性抗體,所分泌的單克隆抗體可特異性識別人類主要組織相容性復合體 I 類分子(HLA-ABC)的共同抗原決定簇,與 HLA-A、HLA-B、HLA-C 抗原均能結合,且交叉反應少,抗體效價高。細胞倍增時間約 30-40 小時,傳代時需用胰dan白酶消化貼壁細胞,傳代比例 1:4-1:6,連續傳代多次后仍能保持穩定的抗體分泌能力和特異性。
培養條件:常規采用含 10% 胎牛血清的 RPMI1640 培養基,添加 1% 青mei素 - 鏈mei素混合液預防污染。培養環境需維持在 37℃、5% CO?的飽和濕度培養箱中,每 2-3 天更換一次培養基,保證細胞生長有充足的營養供應。由于該細胞系對培養條件較為敏感,血清質量對其生長和抗體分泌影響較大,需選擇優質胎牛血清。傳代時,要注意將貼壁和懸浮的細胞都收集起來,避免細胞損失,接種密度需適宜,以維持細胞的良好生長狀態和抗體分泌效率。
檢測鑒定:經嚴格的微生物檢測,該細胞系無支原體、細菌、真菌及常見病毒污染,確保了細胞系的純凈性。通過抗體效價測定,如 ELISA 法,可檢測其分泌抗體的活性和效價,確認抗體分泌能力的穩定性。采用 Western blot、免疫熒光等方法,能驗證抗體與 HLA-ABC 抗原的特異性結合能力,進一步明確抗體的特異性。染色體核型分析顯示,其染色體數目為雙親細胞的總和,兼具兩種細胞的核型特征,驗證了雜交瘤細胞的身份。
應用領域:在組織相容性研究中,W6/32 細胞系分泌的抗體可用于 HLA-ABC 抗原的檢測與分型,助力探索人類白細胞抗原的多態性及遺傳規律,為研究免疫應答的遺傳控制提供重要依據。在免疫組織化學與流式細胞術檢測中,該抗體可作為特異性探針,檢測組織或細胞表面 HLA-ABC 抗原的表達情況,用于腫瘤免疫、自身免疫病等相關研究,例如檢測腫瘤細胞表面 HLA-ABC 抗原的表達變化,分析其與腫瘤免疫逃逸的關系。在移植醫學中,可用于供體與受體的 HLA 配型檢測,評估移植相容性,提高器官yi植的成功率,減少排斥反應的發生。在診斷試劑研發中,其分泌的抗體是多種 HLA-ABC 檢測試劑盒的核心成分,為相關疾病的診斷提供了精準的檢測工具。
總之,W6/32 小鼠雜交瘤細胞系憑借穩定分泌高特異性抗人 HLA-ABC 單克隆抗體的特性,成為免疫學研究與臨床應用中不ke或缺的工具,為推動相關領域的發展提供了有力支持。
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