NTERA-2人惡性多發性畸胎瘤細胞系
NTERA-2人惡性多發性畸胎瘤細胞系，是研究生殖細胞腫瘤及細胞分化機制的重要模型，源自人睪丸惡性畸胎瘤，因保留多能干細胞特性且可被誘導分化為多種體細胞類型，在畸胎瘤發病機制、胚胎發育模擬及再生醫學研究中具有不可替代的價值。
來源與背景：該細胞系于 1980 年由 Andrew P. Andrews 團隊從一位 22 歲男性患者的睪丸畸胎瘤組織中分離建立，是首ge能在體外穩定傳代且保持多向分化潛能的惡性畸胎瘤細胞系。與普通腫瘤細胞系不同，其兼具腫瘤細胞的無限增殖能力和胚胎干細胞的多分化潛能，能模擬畸胎瘤中未分化細胞向神經、上皮等多種組織類型轉化的過程，為解析生殖細胞腫瘤的發生機制提供了理想模型，尤其適合研究畸胎瘤中干細胞樣細胞的調控網絡。
細胞特性：形態上呈圓形或橢圓形，排列松散，細胞質少而透亮，細胞核大且核仁顯著，未分化狀態下呈集落狀生長，具有典型的干細胞形態特征。核心特性為多能性標志物高表達，表達 Oct4、Nanog、Sox2 等胚胎干細胞核心轉錄因子，同時高表達 CD30 等畸胎瘤特異性抗原；可誘導分化能力，在視huang酸（RA）處理下，能高效分化為神經元、膠質細胞等神經細胞類型，分化率可達 70% 以上，也可在特定條件下分化為上皮細胞和肌肉細胞。細胞倍增時間約 48-56 小時，增殖速度中等，傳代時需用溫和消化液處理以保護細胞活性，傳代比例 1:3-1:5，連續傳代 40 次后仍保持多分化潛能。
培養條件：采用含 15% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養基，需添加 2mM 谷an酰胺和 1% 非必需氨基酸以維持多能性，部分培養體系會加入 bFGF 抑制自發分化。培養環境需嚴格控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養基，細胞密度維持在 10%-50% 之間，低密度培養更利于保持未分化狀態。與乳腺癌細胞系不同，其對血清質量極為敏感，需使用胚胎干細胞級胎牛血清，傳代時 0.05% 胰dan白酶 + EDTA 消化 5-7 分鐘，吹打力度輕柔以避免細胞損傷。
檢測鑒定：經微生物篩查，該細胞系無支原體、細菌、真菌污染，符合生物安全二級標準。免疫熒光檢測顯示，Oct4 和 Sox2 在細胞核內呈強陽性表達，CD30 膜表達陽性，符合畸胎瘤干細胞特征。RT-PCR 證實多能性基因 Nanog 和 Oct4 的 mRNA 水平顯著高于普通腫瘤細胞，分化后神經元標志物 β-III tubulin 表達上調 20 倍以上。核型分析呈現近三倍體核型，存在 12 號染色體三體和 17 號染色體部分重復，與臨床惡性畸胎瘤的遺傳學改變高度吻合。裸鼠成瘤實驗中，皮下接種可形成包含神經、上皮、軟骨等多種組織類型的畸胎瘤，驗證其體內多向分化能力。
應用領域：在畸胎瘤研究中，該細胞系常用于解析腫瘤干細胞的自我更新機制，研究發現其通過激活 Wnt/β-catenin 通路維持未分化狀態，β-catenin 抑制劑可顯著降低 Oct4 表達并抑制集落形成，為靶向畸胎瘤干細胞的治療提供了理論依據。在神經分化研究中，是模擬神經元發育的經典模型，視huang酸誘導分化過程中，可觀察到神經干細胞標志物 Nestin 先升高后降低，最終形成成熟神經元網絡，為阿爾茨海默病等神經退行性疾病的細胞模型構建提供了工具。在藥物篩選方面，適用于評估抗畸胎瘤藥物的療效，通過檢測藥物對未分化細胞增殖及分化能力的影響，篩選能特異性殺傷腫瘤干細胞的候選化合物，如shun鉑對其的半數抑制濃度（IC50）約為 2.5μM，且能抑制畸胎瘤形成。此外，該細胞系可用于研究表觀遺傳調控在細胞分化中的作用，DNA 甲基轉移酶抑制劑處理后，其多能性基因的甲基化水平降低，分化潛能顯著改變，為理解細胞命運決定的表觀遺傳機制提供了線索。
該細胞系的du特優勢在于能在體外模擬 “腫瘤發生" 與 “胚胎發育" 的交叉過程，通過對比其未分化與分化狀態的差異，可同時解析腫瘤惡變和細胞定向分化的分子機制。其分化過程的可調控性也使其成為研究細胞命運轉換的理想模型，為再生醫學中干細胞誘導分化的優化提供了參考。
總之，NTERA-2 人惡性多發性畸胎瘤細胞系憑借其du特的多能性特征和穩定的生物學行為，成為連接生殖細胞腫瘤研究與發育生物學的關鍵橋梁，為解析畸胎瘤發病機制、模擬胚胎發育過程及開發新型治療策略提供了堅實的實驗基礎。
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