NRK49F正常大鼠腎細胞系（EGF受體陽性）
NRK49F正常大鼠腎細胞系（EGF受體陽性）作為源自大鼠腎臟間質的成纖維細胞模型，因保留腎臟成纖維細胞的典型生物學特征及活化潛能，在腎臟纖維化機制研究中具有核心價值，成為探究腎間質纖維化病理過程及干預策略的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠正常腎臟皮質間質組織，經原代培養和永生化處理建立。細胞形態在靜息狀態下呈長梭形，胞體細長，兩端尖細，細胞核呈桿狀或橢圓形，核仁不明顯；活化后細胞體積增大 30%，呈現星狀或多角形，胞質內粗面內質網顯著增多。生長方式為貼壁生長，呈平行排列或漩渦狀分布，具有接觸抑制特性，傳代后 24 小時貼壁率達 96%，顯著高于腎臟上皮細胞系。核心參數表現出成纖維細胞特征：倍增時間約 48 小時，連續傳代 50 次后仍保持正常二倍體核型（染色體數 42 條）；成纖維細胞標志物波形蛋白（Vimentin）、α- 平滑肌肌動蛋白（α-SMA）在靜息狀態下陽性率分別為 98% 和 12%，活化后 α-SMA 陽性率升至 85%；膠原蛋白 I（Col I）分泌量達 23μg/10?細胞 / 24h，纖維連接蛋白（FN）表達量是腎小管上皮細胞的 6.8 倍；無微生物污染，細胞純度達 97%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在腎臟纖維化機制研究中，NRK49F 細胞經轉化生長因子 -β1（TGF-β1）刺激后，48 小時內 α-SMA 表達量增加 5.2 倍，Col I mRNA 水平升高 4.7 倍，細胞收縮能力增強 3.8 倍，可模擬體內腎成纖維細胞向肌成纖維細胞轉化的關鍵過程，為解析纖維化啟動機制提供理想模型。藥物干預研究方面，該細胞在姜黃素處理下，TGF-β1 誘導的 Col I 分泌量下降 42%，Smad3 磷酸化水平降低 58%，能很好地反映抗纖維化藥物的干預效果，助力靶向藥物篩選。在腎損傷微環境研究領域，該細胞與腎小管上皮細胞共培養時，上皮細胞損傷釋放的細胞因子可使 NRK49F 活化率提升 35%，而活化的成纖維細胞會反過來抑制上皮細胞增殖，形成 “上皮 - 間質細胞交叉對話" 模型，適用于研究腎損傷后的間質 - 上皮相互作用。此外，將該細胞接種于裸鼠腎被膜下，可構建腎纖維化動物模型，用于評估候選藥物的體內抗纖維hua療效。
培養與保存規范：靜息狀態培養推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基，添加 1% 抗生素混合液，培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養箱。誘導活化時采用含 5ng/ml TGF-β1 的培養基，處理時間通常為 24-72 小時，活化效率可達 80% 以上。培養基需每 2-3 天更換一次，更換時動作輕柔以避免細胞脫落。傳代時采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液處理，37℃孵育 5-8 分鐘，待細胞邊緣回縮后加入含血清的培養基終止消化，傳代比例為 1:3-1:5，每 3-4 天傳代一次，維持細胞融合度在 60%-70% 以保持生物學活性。凍存液配方為基礎培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，經程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇細胞存活率達 93% 以上，2-3 代內可恢復正常的活化潛能。運輸采用 T-25 培養瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養 24 小時，更換培養基后觀察細胞形態，確認無異常漂浮物后進行后續實驗。該細胞系僅限科研使用，禁止用于臨床診療相關研究。
NRK49F 大鼠腎成纖維細胞系以其穩定的活化特性、明確的纖維化標志物表達及易于體外操控的優勢，在腎臟纖維化基礎研究與藥物開發中發揮著不可替代的作用，為揭示腎間質纖維化的分子機制和開發新型抗纖維hua療法提供了可靠的細胞平臺。
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