GR-M小鼠乳腺癌細胞系
GR-M小鼠乳腺癌細胞系是研究乳腺癌進展與耐藥機制的重要模型,憑借du特的侵襲轉移能力和放hua療抗性特征,在臨床轉化研究中具有特殊價值。
來源與背景:該細胞系源自 BALB/c 小鼠的自發性乳腺癌組織,經體外連續傳代與耐藥篩選建立。原始腫瘤具有三陰乳腺癌的部分表型特征,在長期培養中保留了高度惡性的生物學行為,尤其在放hua療壓力下仍能穩定增殖,為研究難治性乳腺癌的發生機制提供了理想模型,其遺傳背景與臨床耐藥患者的腫瘤特征存在一定相似性。
細胞特性:形態上呈上皮樣與梭形混合形態,細胞邊界不清,細胞質內可見較多顆粒,貼壁生長時呈現雜亂無章的排列,易形成細胞簇和偽足結構。其核心特性是多重耐藥表型—— 對shun鉑、紫shan醇等常用hua療藥物及 γ 射線均表現出顯著抗性,耐藥指數是普通乳腺癌細胞系的 3-5 倍。同時,該細胞系具有強侵襲轉移能力,Transwell 實驗中穿膜細胞數是 MA782/5S-8101 細胞的 2 倍以上,且高表達 MMP-2、MMP-9 等基質金屬蛋白酶。細胞倍增時間約 28 小時,傳代時需用 0.25% 胰dan白酶與 EDTA 混合液消化,傳代比例 1:5,連續傳代 60 次后仍保持耐藥性與侵襲性穩定。
培養條件:采用含 15% 胎牛血清的 RPMI1640 培養基,需添加 1μmol/L shun鉑維持耐藥表型(傳代時可省略),常規添加 1% 雙抗。培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度,培養基更換頻率為每 24 小時一次,以清除大量分泌的代謝廢物。與激素敏感性細胞不同,其生長無需激素支持,但對血清質量敏感,建議使用活性炭處理的胎牛血清以排除激素干擾。
檢測鑒定:經微生物檢測確認無支原體、病毒污染,STR 分型與 BALB/c 小鼠匹配。免疫熒光顯示其低表達雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和 HER2,符合三陰表型;Western blot 檢測可見 ABCB1(P - 糖蛋白)和 ABCC1 等耐藥蛋白高表達。染色體核型分析顯示存在復雜核型變異,包括 8 號染色體三體和 11 號染色體缺失,與耐藥表型相關。
應用領域:在耐藥機制研究中,常用于解析 ABC 轉運蛋白介導的藥物外排、DNA 損傷修復增強等耐藥通路,通過 CRISPR 技術敲除 ABCB1 可逆轉其耐藥性,驗證關鍵基因的功能。在放hua療增敏研究中,可篩選能逆轉耐藥的小分子化合物,如 PI3K 抑制劑與hua療藥物聯用可使殺傷率提升 40%。構建裸鼠移植瘤模型時,尾靜脈接種可形成廣泛肺轉移,成瘤率達 100%,是評估抗轉移藥物體內活性的可靠模型。在免yi治療研究中,其低表達 PD-L1 的特性為研究免疫檢查點抑制劑耐藥提供了線索。
該細胞系的du特jia值在于模擬了臨床難治性乳腺癌的核心特征,其耐藥與轉移表型的高度穩定性使其成為連接基礎研究與臨床治療的關鍵工具,為開發針對耐藥乳腺癌的新型療法提供了重要實驗依據。
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