MEF小鼠胚胎成纖維細胞系
MEF小鼠胚胎成纖維細胞系源自妊娠 12.5-14.5 天的小鼠胚胎組織，是的成纖維細胞模型，因能模擬胚胎發育過程中的間質細胞功能，在干細胞培養、基因編輯及發育生物學研究中應用廣泛。
該細胞系具有典型的成纖維細胞形態與表型特征。顯微鏡下，細胞呈長梭形或多角形，貼壁生長時排列緊密，呈現放射狀或漩渦狀生長模式，胞質豐富，細胞核呈橢圓形，核仁清晰可見。免疫表型分析顯示，MEF 細胞高表達波形蛋白（Vimentin）和纖維連接蛋白（Fibronectin），不表達上皮細胞標志物細胞角蛋白（Cytokeratin），明確其間質細胞屬性。與其他成纖維細胞系相比，原代 MEF 細胞保留了更多胚胎期的生物學特性，傳代至 5-7 代內仍能維持穩定的生長狀態和功能表達。
在體外培養體系中，MEF 細胞展現出良好的生長適應性。基礎培養時，在含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基中，37℃、5% CO?條件下生長旺盛，傳代周期約 48-72 小時，細胞匯合度達到 80%-90% 時需及時傳代，以避免接觸抑制導致的生長停滯。其顯著特點是對培養環境的兼容性強，在低糖或高糖 DMEM 培養基中均能正常增殖，且對血清質量的敏感性較低，這一特性降低了大規模培養的技術門檻。此外，MEF 細胞的凍存復蘇效率高，采用含 10% 二甲基亞砜（DMSO）的凍存液凍存后，復蘇存活率可達 90% 以上，便于長期保存與實驗儲備。
MEF 細胞的核心價值體現在干細胞培養中的支持作用。作為經典的飼養層細胞，經絲lie霉素 C 處理或 γ 射線照射后，其失去增殖能力但仍能分泌白血病抑制因子（LIF）、骨形態發生蛋白（BMPs）等細胞因子，為胚胎干細胞（ESCs）或誘導多能干細胞（iPSCs）提供維持未分化狀態的微環境。研究表明，MEF 飼養層可通過激活干細胞內的 STAT3 信號通路，抑制分化相關基因的表達，使干細胞保持多向分化潛能 —— 在 MEF 細胞支持下，ESCs 可維持典型的克隆形態，高表達 Oct4、Nanog 等干細胞標志物，且在體外分化實驗中能形成包含內、中、外三個胚層的擬胚體。
在基因編輯研究中，MEF 細胞是 CRISPR/Cas9 技術的理想驗證模型。其高轉染效率（脂質體介導轉染效率可達 30%-50%）和快速增殖特性，使其適合用于基因敲除或敲入實驗的初步驗證。例如，通過編輯 MEF 細胞中的 p53 基因，可觀察細胞周期調控異常及凋亡抗性增強的表型，為探究該基因在細胞應激反應中的作用提供直接證據。此外，MEF 細胞易于建立永生化細胞系，通過導入 SV40 大 T 抗原或端粒酶逆轉錄酶（TERT）基因，可獲得無限增殖的 MEF 細胞，克服原代細胞傳代次數有限的缺陷，適合開展長期實驗研究。
在發育生物學研究中，MEF 細胞可用于模擬胚胎組織的間質 - 上皮相互作用。將其與胚胎上皮細胞共培養，能觀察到上皮細胞形態發生改變，如極性建立和腺體結構形成，這一過程依賴于 MEF 細胞分泌的轉化生長因子 -β（TGF-β）和肝細胞生長因子（HGF）的調控，為解析胚胎器官發生的分子機制提供了體外模型。此外，不同品系小鼠來源的 MEF 細胞（如 C57BL/6、BALB/c）在細胞因子分泌譜上存在差異，這種遺傳背景的多樣性使其可用于研究遺傳因素對細胞功能的影響。
在病毒學研究中，MEF 細胞對多種逆轉錄病毒和慢病毒具有易感性，常作為病毒包裝與滴度測定的宿主細胞。通過將病毒載體轉染至 MEF 細胞，可高效生產重組病毒顆粒，用于后續的基因遞送實驗，例如在 iPSCs 誘導過程中，MEF 細胞包裝的慢病毒可攜帶 Oct4、Sox2 等重編程因子，顯著提高重編程效率。
隨著 3D 培養技術的發展，MEF 細胞構建的三維支架模型能更真實地模擬體內胚胎間質環境。其與干細胞共培養形成的類器官結構，可用于研究細胞間的動態相互作用及組織分化的時空調控，為解析胚胎發育的復雜過程提供了更接近生理狀態的研究平臺。此外，MEF 細胞在藥物安全性評價中也有應用，其對致畸物的敏感性可用于評估化合物對胚胎發育的潛在危害，通過檢測細胞活力和分化能力的變化，為藥物的胚胎毒性篩選提供參考數據。
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