Wrh-f2大鼠肝癌細胞系
Wrh-f2大鼠肝癌細胞系作為源自大鼠自發性肝癌組織的惡性上皮細胞模型，因具備顯著的肝內轉移潛能和藥物抵抗特性，在肝癌侵襲轉移機制、耐藥性研究及抗腫瘤藥物篩選中具有重要價值，成為探究肝細胞癌惡性進展的關鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠自發性肝癌組織，經原代培養和克隆化篩選建立。細胞形態呈上皮樣，多為多邊形或短梭形，部分細胞呈現不規則形態，胞體大小不均（直徑約 20-25μm），胞質豐富，可見較多嗜酸性顆粒，約 15% 細胞呈現多核現象，細胞核大而畸形，核仁明顯且數量較多（2-4 個）。生長方式為貼壁生長，呈雜亂堆疊狀排列，無接觸抑制，傳代后 24 小時貼壁率達 94%。核心參數表現出肝癌細胞特征：倍增時間約 38 小時，連續傳代 40 次后仍保持穩定的增殖能力；染色體核型為亞二倍體（染色體數 38-40 條），存在多條染色體易位和缺失現象；肝癌特異性標志物甲胎蛋白（AFP）陽性率達 90%，白蛋白表達量為正常肝細胞的 28%；具有較強的侵襲能力，Transwell 實驗中穿膜細胞數是普通肝癌細胞系的 2.5 倍；對常用hua療藥物阿mei素的耐藥指數為 3.2，表現出明顯的藥物抵抗特性；無微生物污染，細胞純度達 97%，保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值：在肝癌轉移機制研究中，Wrh-f2 細胞經肝細胞生長因子（HGF）處理 48 小時后，基質金屬蛋白酶 - 9（MMP-9）活性增強 4.5 倍，上皮間質轉化標志物 N - 鈣粘蛋白表達量增加 3.8 倍，遷移能力提升 60%，可模擬肝癌細胞在肝內的侵襲轉移過程，為解析肝癌轉移的分子機制提供理想模型。
藥物耐藥性研究方面，該細胞在長期低劑量阿mei素處理后，多藥耐藥基因 1（MDR1）表達量增加 5.2 倍，細胞內藥物蓄積量下降 45%，凋亡率降低 60%，可用于探究肝癌細胞獲得性耐藥的形成機制，為逆轉肝癌耐藥的藥物研發提供實驗基礎。
在抗腫瘤藥物篩選領域，該細胞對靶向藥物索拉非尼的敏感性較低，半數抑制濃度（IC50）為 12μmol/L，是敏感細胞系的 3 倍，經聯合用藥處理后，凋亡率提升至 58%，適用于評估聯合用藥方案的抗肝癌效果。此外，將該細胞接種于大鼠肝臟，2 周后肝內轉移灶數達 6-8 個，肺轉移率達 40%，可用于構建肝癌多器官轉移模型，評估藥物對轉移灶的抑制作用。
培養與保存規范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基，添加 1% 非必需氨基酸、1mM 丙酮酸鈉及 1% 抗生素混合液，培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基需每 2 天更換一次，以維持細胞的高活性。傳代時，用 PBS 沖洗細胞 2 次，加入專用細胞解離液，37℃孵育 8-10 分鐘，待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落，傳代比例為 1:3-1:5，每 2-3 天傳代一次，避免細胞過度密集影響其侵襲能力。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細胞濃度調整為 6×10?個 /ml，經程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇存活率達 85% 以上，2-3 代內可恢復正常的增殖和侵襲能力。運輸采用 T-25 培養瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養 24 小時，更換培養基后觀察細胞形態，確認無異常漂浮物后進行實驗。該細胞系僅限科研使用，操作需符合生物安全二級防護要求。
Wrh-f2 大鼠肝癌細胞系以其顯著的轉移潛能、藥物抵抗特性及穩定的生物學特征，在肝癌轉移與耐藥研究領域發揮著重要作用，為揭示肝癌惡性進展機制和開發新型治療策略提供了可靠的細胞平臺。
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