Ca Ski [CaSki]人宮頸癌細胞系
Ca Ski [CaSki]人宮頸癌細胞系于 1977 年從一位 43 歲女性宮頸鱗狀細胞癌患者的病灶組織中分離建立，作為首ge被發(fā)現整合人ru頭瘤病毒 16 型（HPV16）全基因組的細胞系，它為揭示宮頸癌與 HPV 的關聯提供了關鍵研究對象，在宮頸癌基礎研究與臨床轉化領域意義深遠。
在細胞生物學特性上，Ca Ski 細胞呈上皮樣形態(tài)，顯微鏡下多為多邊形或不規(guī)則形，細胞間連接緊密，常以簇狀生長。其最tu出的特征是穩(wěn)定整合了約 600 拷貝的 HPV16 病毒基因組，E6 和 E7 癌蛋白持續(xù)高表達。E6 蛋白通過結合并降解抑癌蛋白 p53，使其泛素化降解速率提升 300%，導致細胞周期調控紊亂；E7 蛋白則與視網膜母細胞瘤蛋白（pRb）結合，釋放轉錄因子 E2F，驅動細胞異常增殖。研究表明，Ca Ski 細胞的倍增時間約為 22 - 24 小時，較正常宮頸上皮細胞快 3 倍以上。在侵襲轉移能力方面，Transwell 實驗顯示，Ca Ski 細胞穿過 Matrigel 基質膠的數量是正常細胞的 8 - 10 倍；劃痕愈合實驗中，其傷口閉合速度可達 65μm/h。此外，Ca Ski 細胞還具有高克隆形成能力，在軟瓊脂培養(yǎng)中，單個細胞形成克隆的效率達 35%，皮下接種免疫缺陷小鼠后，7 - 10 天即可形成明顯腫瘤，成瘤率高達 92%，且部分腫瘤會發(fā)生肺部轉移。
Ca Ski 細胞的培養(yǎng)條件相對常規(guī)。常用含 10% 胎牛血清（FBS）、1% 雙抗（青mei素 - 鏈mei素）的 RPMI 1640 培養(yǎng)基，FBS 提供的生長因子可滿足細胞快速增殖需求。培養(yǎng)環(huán)境需維持在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中，當細胞融合度達到 80% - 90% 時，按 1:3 - 1:4 的比例進行傳代，使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化細胞，傳代周期約 3 - 4 天。新接種細胞 2 - 4 小時開始貼壁，12 小時內基本完成貼壁過程。培養(yǎng)過程中需嚴格遵循無菌操作，每 2 - 3 天更換一次培養(yǎng)液，定期通過顯微鏡觀察細胞形態(tài)，若出現細胞變圓、脫落等現象，需警惕污染或細胞老化。
憑借du特的生物學特性，Ca Ski 細胞系在宮頸癌研究領域應用廣泛。在機制研究層面，科研人員利用該細胞系發(fā)現，微小 RNA - 218（miR - 218）可通過靶向 HPV16 E6 mRNA，抑制 E6 蛋白表達，進而恢復 p53 活性，誘導細胞凋亡；長鏈非編碼 RNA LncRNA - CASC19 可與 E7 蛋白相互作用，增強 Wnt/β-catenin 信號通路活性，促進細胞侵襲。在藥物研發(fā)方面，Ca Ski 細胞系是評估宮頸癌hua療藥物、HPV 靶向藥物及免yi治療藥物的核心模型。例如，shun鉑在 Ca Ski 細胞中的 IC??值為 15μM，可顯著抑制細胞增殖；新型 HPV E6/E7 蛋白疫苗在 Ca Ski 細胞荷瘤小鼠模型中，可使腫瘤體積縮小 60%。此外，基于 Ca Ski 細胞構建的類器官模型，能更真實模擬腫瘤微環(huán)境，助力探索聯合治療方案。不過，由于長期傳代可能導致 HPV 基因組拷貝數改變，實驗前需通過 PCR 檢測 HPV16 DNA 含量、Western blot 分析 E6/E7 蛋白表達等手段，對細胞系進行嚴格鑒定，確保實驗結果的可靠性與重復性。
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