RL1大鼠肺細胞系
RL1大鼠肺細胞系作為源自大鼠肺組織的上皮細胞模型，因保留肺上皮細胞te有的呼吸功能相關(guān)特性、屏障保護作用及損傷應(yīng)答機制，在肺部生理功能調(diào)控、呼吸系統(tǒng)疾病機制及藥物肺毒性評估中具有重要價值，成為探究肺部相關(guān)疾病的關(guān)鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠肺實質(zhì)的支氣管及肺泡上皮組織，經(jīng)原代培養(yǎng)和純化獲得。細胞形態(tài)呈典型的上皮樣，多為立方形或多邊形，胞體大小均勻（直徑約 16-22μm），胞質(zhì)豐富且呈嗜酸性，可見大量線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，約 12% 的細胞存在細小胞質(zhì)突起，細胞核呈圓形或橢圓形，位于細胞中央，核仁清晰。生長方式為貼壁生長，呈單層鋪路石樣排列，接觸抑制明顯，傳代后 24 小時貼壁率達 94%。核心參數(shù)符合正常肺上皮細胞特征：倍增時間約 58 小時，連續(xù)傳代 20 次后仍保持穩(wěn)定的生物學(xué)特性；表面標(biāo)志物表達獨te，甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子 - 1（TTF-1）陽性率達 95%，細胞角蛋白 18（CK18）陽性率 93%，緊密連接蛋白 occludin 陽性率 90%；具有正常的二倍體核型（染色體數(shù) 42 條），無染色體畸變；呼吸功能相關(guān)特性顯著，可表達肺泡表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白 A（SP-A），基礎(chǔ)分泌量達 28ng/mL，對氧氣的轉(zhuǎn)運效率達適宜生理范圍；分泌功能活躍，炎癥因子 IL-6 基礎(chǔ)分泌量為 15pg/mL，受刺激后可顯著升高；無微生物污染，細胞純度達 97%，保障實驗結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價值：在呼吸功能相關(guān)機制研究中，RL1 細胞經(jīng)低氧（5% 氧氣）處理 48 小時后，缺氧誘導(dǎo)因子 - 1α（HIF-1α）表達量增加 4.3 倍，血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）分泌量提升 60%，可模擬缺氧狀態(tài)下肺上皮細胞對呼吸功能的調(diào)節(jié)過程，為解析肺部氧氣代謝的分子機制提供理想模型。
肺部炎癥研究方面，該細胞經(jīng)脂多糖（LPS）處理后，炎癥因子 TNF-α 分泌量增加 5.2 倍，白細胞介素 - 8（IL-8）表達量提升 65%，細胞凋亡率達 38%；而經(jīng)抗炎藥物處理后，炎癥反應(yīng)強度下降 58%，細胞存活率提升 52%，可模擬細菌性肺炎中的肺上皮損傷過程，適用于探究肺部炎癥的發(fā)病機制及治療策略。
肺損傷修復(fù)研究領(lǐng)域，該細胞經(jīng)二氧化氮（肺損傷誘導(dǎo)劑）處理后，氧化應(yīng)激水平提升 70%，修復(fù)相關(guān)基因 HSP70 表達量增加 4.8 倍，細胞遷移速率提升 55%，能很好地模擬化學(xué)性肺損傷及修復(fù)過程，為探究肺損傷后的再生機制提供實驗基礎(chǔ)。此外，該細胞與肺巨噬細胞共培養(yǎng)時，巨噬細胞的吞噬活性提升 45%，炎癥因子分泌量增加 3.2 倍，可用于探究肺上皮細胞與免疫細胞相互作用在肺部疾病中的調(diào)控機制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基，添加 2mM 谷an酰胺、0.1ng/mL 表皮生長因子（EGF）及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2-3 天更換一次，以維持細胞的正常功能和活性。傳代時，用 PBS 沖洗細胞 2 次，加入專用上皮細胞解離液，37℃孵育 8-10 分鐘，待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落，傳代比例為 1:2-1:3，每 5-6 天傳代一次，避免過度傳代導(dǎo)致功能下降。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細胞濃度調(diào)整為 3×10?個 /ml，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復(fù)蘇存活率達 86% 以上，3-4 代內(nèi)可恢復(fù)正常的生長和功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養(yǎng)瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時，更換培養(yǎng)基后觀察細胞形態(tài)，確認無異常漂浮物且排列規(guī)則后進行實驗。該細胞系僅限科研使用，操作時需避免頻繁更換培養(yǎng)條件，以防影響其呼吸功能相關(guān)特性及損傷應(yīng)答能力。
RL1 大鼠肺細胞系以其穩(wěn)定的肺上皮特性、完整的呼吸功能相關(guān)特征及典型的損傷應(yīng)答能力，在肺部生理研究、呼吸系統(tǒng)疾病機制探索及藥物研發(fā)中發(fā)揮著重要作用，為揭示肺部疾病的發(fā)病機制和開發(fā)肺保護藥物提供了可靠的細胞模型。
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