AML-12小鼠正常肝細(xì)胞系
AML-12小鼠正常肝細(xì)胞系源自小鼠肝臟組織,是一種保留了正常肝細(xì)胞核心生物學(xué)特性的永生化細(xì)胞系,因在代謝功能和激素應(yīng)答方面的突出表現(xiàn),成為肝臟生理、代謝疾病及藥物研發(fā)領(lǐng)域的重要研究模型。
作為貼近生理狀態(tài)的肝細(xì)胞模型,AML-12 細(xì)胞具備豐富的功能特征。它能穩(wěn)定表達(dá)肝細(xì)胞特異性標(biāo)志物,如白蛋白、細(xì)胞色素 P450 家族成員(CYP3A11、CYP2E1)等,完整保留了肝臟的物質(zhì)代謝功能 —— 可參與糖、脂、蛋白質(zhì)的合成與分解,例如在胰島素刺激下能顯著提升葡萄糖攝取能力,模擬體內(nèi)肝細(xì)胞對(duì)血糖的調(diào)節(jié)作用。同時(shí),其分泌膽汁酸和尿素的能力與原代肝細(xì)胞高度一致,為研究肝臟的解毒和排泄功能提供了可靠工具。此外,AML-12 細(xì)胞對(duì)多種細(xì)胞因子和激素(如 TNF-α、糖皮質(zhì)激素)具有典型應(yīng)答,可用于解析肝臟的免疫調(diào)節(jié)和應(yīng)激反應(yīng)機(jī)制。
在體外培養(yǎng)體系中,AML-12 細(xì)胞展現(xiàn)出良好的適應(yīng)性和穩(wěn)定性。在添加血清和胰島素 - 轉(zhuǎn)鐵蛋白 - 硒(ITS)的 DMEM/F12 培養(yǎng)基中,細(xì)胞呈多邊形上皮樣形態(tài),貼壁生長(zhǎng)態(tài)勢(shì)穩(wěn)定,傳代周期約 48-72 小時(shí),連續(xù)傳代 50 次后仍能保持功能表型穩(wěn)定。與原代肝細(xì)胞相比,它克服了原代培養(yǎng)中細(xì)胞存活時(shí)間短、功能易衰退的缺陷,且均一性更高,避免了個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,適合開展大規(guī)模、重復(fù)性的分子機(jī)制研究和藥物篩選實(shí)驗(yàn)。
AML-12 細(xì)胞的研究?jī)r(jià)值廣泛體現(xiàn)在多個(gè)領(lǐng)域。在代謝疾病研究中,通過構(gòu)建游離脂肪酸誘導(dǎo)的細(xì)胞模型,可模擬非酒精性脂肪肝的脂滴蓄積過程,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量、炎癥因子(如 IL-6)表達(dá)及氧化應(yīng)激水平,解析疾病的發(fā)病機(jī)制;在藥物代謝研究中,利用其豐富的藥物代謝酶活性,可評(píng)估候選藥物在肝臟中的代謝途徑、代謝產(chǎn)物及潛在毒性,為藥物安全性評(píng)價(jià)提供體外數(shù)據(jù);在肝臟再生研究中,其對(duì)肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)的應(yīng)答特性,為探究肝細(xì)胞增殖與分化的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提供了理想模型,例如通過檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白 D1 的表達(dá)變化,分析 HGF 對(duì)細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用。
此外,AML-12 細(xì)胞在天然產(chǎn)物活性篩選中也發(fā)揮著重要作用。通過檢測(cè)其在中藥提取物處理后的抗氧化酶(如 SOD、GSH-Px)活性變化,可快速評(píng)估天然產(chǎn)物的肝保護(hù)潛力,為開發(fā)保肝藥物提供篩選平臺(tái)。
隨著 3D 生物打印和共培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展,AML-12 細(xì)胞與肝星狀細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)建的肝臟類器官模型,能更精準(zhǔn)地模擬體內(nèi)肝臟微環(huán)境,為解析復(fù)雜肝臟疾病的病理機(jī)制和開發(fā)靶向治療藥物提供更接近生理狀態(tài)的研究工具。
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