HP615小鼠肺癌瘤株細胞系
HP615小鼠肺癌瘤株細胞系，源自自發性肺癌，貼壁生長，成瘤快，易轉移至胸腔，表達 CK7 等標志物，適用于肺癌轉移機制及藥物篩選研究。
HP615 小鼠肺癌瘤株細胞系源自 615 近交系小鼠的自發性肺腺癌，是具有快速成瘤特性和胸腔轉移傾向的惡性上皮細胞模型，在肺癌發生發展機制、胸腔轉移規律及抗腫瘤藥物篩選研究中具有重要價值，為解析肺癌的局部侵襲與轉移特征提供了理想工具。
該細胞系呈現典型的肺腺癌細胞形態與表型特征。顯微鏡下，細胞呈多邊形或短梭形，以貼壁生長為主，排列呈不規則片狀，細胞間連接松散，細胞大小差異較明顯（直徑 12-18μm），核質比高，細胞核呈圓形或橢圓形，染色質呈粗顆粒狀，可見 1-2 個核仁，核分裂象常見（每 10 個高倍視野 6-8 個），胞質豐富，呈弱嗜堿性，部分細胞含黏液空泡。免疫表型分析顯示，細胞高表達肺腺癌相關標志物，如細胞角蛋白 7（CK7）、癌胚抗原（CEA），流式細胞術檢測陽性率分別達 90% 和 85%，而鱗狀上皮標志物 CK5/6 呈陰性，證實其腺上皮來源特性，同時表達轉移相關分子基質金屬蛋白酶（MMP-13），為其轉移潛能提供分子基礎。
體外培養體系中，HP615 細胞展現出穩定的增殖能力與強侵襲潛能。最適培養條件為含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基，在 37℃、5% CO?環境下，傳代周期約 48 小時，對數生長期細胞活力達 90% 以上，倍增時間約 30 小時。其顯著特點是體外侵襲能力較強，Transwell 侵襲實驗中 24 小時穿透基質膠的細胞數是正常肺上皮細胞的 6 倍，這種侵襲能力與其高表達整合素 αvβ6 密切相關，該分子可與肺間質中的纖維連接蛋白結合，抗體阻斷后侵襲率下降 55%。軟瓊脂克隆形成率達 25%，克隆形態呈不規則團塊狀，反映其惡性增殖特性。凍存復蘇性能良好，液氮凍存后復蘇存活率超 85%，連續傳代 40 次后，細胞的表型特征和侵襲能力無明顯改變，保證實驗的穩定性。
HP615 細胞的核心價值體現在其對肺癌胸腔轉移過程的精準模擬。在動物模型中，將 1×10?個細胞接種于 615 小鼠肺葉，7 天形成原發瘤，14 天胸腔轉移率達 60%，可見胸膜結節和胸腔積液，21 天縱隔淋巴結轉移率達 50%，病理切片顯示腫瘤細胞沿肺泡壁生長，穿透胸膜侵犯胸壁，與人類肺腺癌的胸腔轉移特征高度一致。通過熒光標記追蹤發現，腫瘤細胞先侵襲肺間質，穿透臟層胸膜進入胸腔，進而定植于壁層胸膜，這種轉移路徑依賴胸膜間皮細胞分泌的 CXCL12，CXCR4 拮抗劑處理可使胸腔轉移率下降 50%。
在發病機制研究中，該細胞系揭示了肺癌發生的分子機制。基因測序顯示，細胞存在 KRAS 基因激活突變（G12V），導致 RAS/RAF/MEK 通路持續激活，Western blot 檢測顯示 ERK1/2 磷酸化水平較正常肺上皮細胞高 8 倍，使用 MEK 抑制劑后，細胞增殖率下降 45%，凋亡率上升 30%，證實其在肺癌發生中的驅動作用。此外，細胞中抑癌基因 PTEN 存在缺失，導致 PI3K/Akt 通路激活，Akt 磷酸化水平上調 6 倍，PI3K 抑制劑處理可顯著抑制細胞增殖。
在轉移機制研究中，HP615 細胞展現出du特的分子調控網絡。研究發現，細胞高表達 Twist1，該轉錄因子可誘導上皮間質轉化，使 E - 鈣粘蛋白表達下降 60%，N - 鈣粘蛋白表達上升 2 倍，促進細胞獲得遷移能力，沉默 Twist1 后，胸腔轉移率下降 45%。同時，細胞分泌血管內皮生長因子（VEGF），可誘導胸腔新生血管形成，為轉移灶生長提供營養，VEGF 抗體處理可使胸腔轉移灶體積縮小 50%。
在藥物篩選應用中，HP615 細胞是評估抗肺癌藥物療效的有效工具。體外實驗顯示，細胞對shun鉑的 IC50 為 5μM，聯合使用 MEK 抑制劑后，IC50 降至 1.5μM，協同指數為 0.8，證實聯合用藥的增效作用。體內實驗中，shun鉑與 MEK 抑制劑聯用可使 615 小鼠原發瘤體積縮小 70%，胸腔轉移率從 60% 降至 25%，療效優于單藥治療。基于其胸腔轉移特性，還可用于抗轉移藥物篩選，某天然化合物處理后，細胞 MMP-13 活性下降 50%，胸腔轉移灶數量減少 40%。
在腫瘤微環境研究中，HP615 細胞與胸膜間皮細胞的相互作用為解析轉移微環境提供了線索。與胸膜間皮細胞共培養時，可誘導間皮細胞分泌 IL-8，促進腫瘤細胞增殖，使克隆形成率提升 35%，IL-8 中和抗體可阻斷這種促進作用。在缺氧微環境中，細胞 HIF-1α 表達上調，誘導醛脫氫酶（ALDH）活性增加，ALDH?細胞比例達 20%，該群細胞具有更強的轉移能力，裸鼠接種后胸腔轉移率達 80%，證實缺氧誘導的腫瘤干細胞樣表型在轉移中的作用。
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