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CHO/HCH18-M II中國倉鼠卵巢細胞系
CHO/HCH18-M II中國倉鼠卵巢細胞系是經基因工程改造的 CHO 衍生株,通過導入 HCH18-M II 基因構建而成,能穩定表達 HCH18-M II 蛋白,因表達穩定性高、功能特異性強,成為蛋白質功能研究與藥物研發的特色模型。其在保留 CHO 細胞易培養、可規模化的優勢基礎上,賦予了靶向研究 HCH18-M II 蛋白的能力,為解析該蛋白參與的生物通路及相關疾病機制提供了精準工具。
構建背景:HCH18-M II 是一種與細胞信號傳導相關的功能蛋白,該細胞系通過載體介導(如含 CMV 啟動子的表達質粒)將 HCH18-M II 基因導入 CHO 細胞,經抗性篩選及單克隆純化獲得穩定表達株,“HCH18-M II" 代表其表達的特異性蛋白,確保蛋白表達的均一性與持續性。
形態與增殖:體外培養呈典型上皮樣形態,貼壁生長,細胞呈多邊形,排列緊密,形態與親本 CHO 細胞一致。在 37℃、5% CO?的培養環境中,增殖穩定,傳代周期約 2-3 天,可適應含血清的常規培養基,也能兼容無血清培養體系,高密度培養時細胞活性仍能保持穩定,為大規模實驗與生產提供了便利。
表達特征:HCH18-M II 蛋白主要定位于細胞特定區域(如細胞膜或細胞質,依蛋白功能而定),表達量是未修飾 CHO 細胞的 6-10 倍(通過蛋白定量檢測),長期傳代(>30 代)后表達量波動<15%。該蛋白分子量與天然狀態一致,能與特異性抗體結合,且保留其生物學活性,可通過功能實驗驗證其參與的信號傳導或分子互作過程。
HCH18-M II 蛋白功能機制研究
靶向藥物篩選與研發
生物通路與疾病關聯研究
優勢:HCH18-M II 蛋白表達穩定,避免了瞬時表達系統的批次差異,實驗重復性好;細胞培養條件簡單,可適應多種培養體系,便于實驗室操作與規模化應用;功能特異性強,能專一性研究 HCH18-M II 相關通路,減少其他蛋白的干擾;與 CHO 細胞的遺傳背景兼容,研究結果可與其他 CHO 衍生模型對比,豐富實驗數據維度。
局限性:長期培養需維持特定篩選壓力(如抗性藥物),否則可能丟失目的基因,增加培養成本;作為異源表達系統,HCH18-M II 蛋白的翻譯后修飾可能與人體細胞存在細微差異,影響部分功能研究的外推性;對部分針對人類細胞的特異性藥物敏感性較低,應用范圍存在一定限制。
培養條件:基礎培養基為含適量血清的常規培養基,添加必要的篩選藥物以維持目的基因穩定表達,同時加入抑菌成分預防污染。傳代時需控制細胞密度,避免過度密集影響蛋白表達,貼壁培養時融合度建議保持在 70%-80%。
功能實驗優化:進行蛋白功能檢測前,需確認細胞中 HCH18-M II 的表達狀態(如通過 Western blot 驗證);設置親本 CHO 細胞作為對照,排除細胞本身特性對實驗結果的干擾;根據蛋白功能特點調整實驗條件,如檢測信號通路時需進行適當的刺激處理,確保能準確反映蛋白的活性變化。
凍存與復蘇:凍存時使用含保護劑的凍存液,梯度降溫后保存于液氮中,以維持細胞活性;復蘇時快速恢復至培養溫度,逐步適應培養基環境,傳代 1-2 次待細胞狀態穩定后再用于實驗,保證實驗結果的可靠性。
CHO/HCH18-M II 細胞系的建立為 HCH18-M II 蛋白相關研究提供了標準化工具,推動了對該蛋白功能及相關通路的深入理解。在基礎研究領域,其助力闡明了 HCH18-M II 在細胞生理過程中的作用機制,為發現新的生物學調控網絡提供了線索;在應用領域,其為靶向藥物篩選提供了高效模型,加速了相關疾病治療藥物的研發進程。隨著研究技術的發展,該細胞系與基因編輯、高通量篩選等技術結合,有望在精準醫學與功能基因組學研究中發揮更大作用。
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