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細(xì)胞

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細(xì)胞系

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U2OS-Luc teT-on人成骨肉瘤細(xì)胞系由 U2OS 細(xì)胞轉(zhuǎn)染熒光素酶基因與四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)而成，可用于腫瘤活體成像及藥物療效動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。

詳細(xì)介紹

U2OS-Luc teT-on人成骨肉瘤細(xì)胞系

U2OS-Luc teT-on人成骨肉瘤細(xì)胞系是基因工程技術(shù)與腫瘤研究深度融合的產(chǎn)物。科研人員以 U2OS 細(xì)胞為原始素材，借助慢病毒載體轉(zhuǎn)染技術(shù)，將熒光素酶基因與四環(huán)素響應(yīng)元件巧妙整合至細(xì)胞基因組中，由此構(gòu)建出一個(gè)具備精準(zhǔn)調(diào)控能力的腫瘤研究模型，為探索成骨肉瘤的奧秘開(kāi)辟了新路徑。

在細(xì)胞形態(tài)學(xué)方面，U2OS-Luc teT-on 細(xì)胞呈現(xiàn)出典型的間充質(zhì)細(xì)胞形態(tài)特征。低倍顯微鏡下，細(xì)胞多呈長(zhǎng)梭形或星狀，通過(guò)細(xì)長(zhǎng)的絲狀偽足相互連接，交織成復(fù)雜而有序的立體網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，仿佛一張精密編織的細(xì)胞大網(wǎng)。在高倍鏡下觀察，胞質(zhì)內(nèi)微絲、微管等細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)豐富且清晰可見(jiàn)，其中肌動(dòng)蛋白絲呈束狀整齊排列，這些結(jié)構(gòu)不僅維持著細(xì)胞的形態(tài)，更為細(xì)胞的遷移和變形提供了強(qiáng)大動(dòng)力。細(xì)胞核大而醒目，占據(jù)細(xì)胞體積的較大比例，核膜邊緣呈現(xiàn)出不規(guī)則的波浪狀，內(nèi)部往往存在多個(gè)核仁，顯示出旺盛的轉(zhuǎn)錄活性，這些形態(tài)特點(diǎn)與臨床成骨肉瘤組織中的細(xì)胞高度相似，為研究提供了直觀且可靠的樣本。

從生物學(xué)功能剖析，U2OS-Luc teT-on 細(xì)胞系兼具成骨肉瘤細(xì)胞的惡性特性與外源基因的可控表達(dá)能力。FGFR3 信號(hào)通路持續(xù)性激活，通過(guò)磷酸化下游的 ERK1/2 與 AKT 蛋白，促使細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶活性顯著增強(qiáng)，從而驅(qū)動(dòng)細(xì)胞以約 32 小時(shí)的周期完成一次倍增。在侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中，細(xì)胞通過(guò)上調(diào) TWIST1 轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)，誘導(dǎo)上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT），使得細(xì)胞極性喪失，E-cadherin 表達(dá)大幅下降，而 N-cadherin 與 Vimentin 水平顯著提升，由此獲得間質(zhì)細(xì)胞特性，侵襲能力得到極大增強(qiáng)。同時(shí)，其分泌的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）量遠(yuǎn)超正常成骨細(xì)胞，達(dá)到 15 倍之多，能夠有效促進(jìn)腫瘤血管的生成，為腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移提供營(yíng)養(yǎng)支持。而四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)賦予了細(xì)胞du特的 “開(kāi)關(guān)" 特性，科研人員通過(guò)添加或撤除強(qiáng)li霉素（Dox），可精確控制熒光素酶基因的表達(dá)，借助活體成像系統(tǒng)，便能實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)地觀測(cè)腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)外的增殖、遷移和轉(zhuǎn)移過(guò)程。

在細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)節(jié)，采用添加 L - 谷an酰胺的高糖 DMEM 培養(yǎng)基，搭配 10% 熱滅活胎牛血清，為細(xì)胞生長(zhǎng)提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。將細(xì)胞置于 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中，模擬體內(nèi)生理環(huán)境。傳代時(shí)運(yùn)用分步消化法，先用 0.05% 胰dan白酶短暫處理破壞細(xì)胞間連接，再用 EDTA 解離細(xì)胞與培養(yǎng)皿的黏附，以保證細(xì)胞活性；凍存遵循嚴(yán)格的程序降溫流程。在科研應(yīng)用領(lǐng)域，該細(xì)胞系成果斐然，助力科研人員發(fā)現(xiàn)靶向 CDK4/6 與 mTOR 的抑制劑聯(lián)合使用，可顯著縮小腫瘤體積；為 CAR-T 免疫療法在成骨肉瘤治療中的應(yīng)用提供了有力證據(jù)；還成功揭示腫瘤細(xì)胞在骨微環(huán)境中的歸巢機(jī)制，為開(kāi)發(fā)抗骨轉(zhuǎn)移藥物提供了新方向。

以上信息僅供參考，詳細(xì)信息請(qǐng)聯(lián)系我們。

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