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GelRed核酸染料(10,000水溶液)
——EB核酸染料的無毒性替代品
產品信息:
產品名稱 | 產品編號 | 產品規格 | 儲存 |
GelRed 核酸染料(10,000×水溶液) | FS0369 | 500μl | 4℃ |
產品描述
GelRed是一種*的油性大分子,不能穿透細胞膜進入細胞內。不易揮發升華,人體不會吸入。艾姆斯氏測試結果也表明GelRed在凝膠染色濃度下*無誘變性,相對于EB的強致癌性是一種安全無毒的核酸染料。GelRed與EB具有相同的光譜特性,無需改變濾光片及觀察裝置(普通紫外凝膠透射儀),在300nm處紫外光激發檢測即可。GelRed適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的dsDNA,ssDNA以及RNA染色,可以選擇膠染法或泡染法進行染色,使用非常方便和靈活。
使用方法
一、膠染法(同EB,電泳前染色)
1) 制膠時加入GelRed 核酸染料(每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL GelRed 10,000×水溶液)。
2) 按照常規方法進行電泳。
注意事項
1) 此方法比較節省染料,500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
2) 由于GelRed具有良好的熱穩定性,可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇將GelRed儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。
3) GelRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
4) 含有染料的預制凝膠溶液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
5) 如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關,請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
6) 膠染法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
二、泡染法(電泳后染色)
1. 按照常規方法進行電泳。
2. 用H2O將GelRed 10,000×水溶液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(如將15μL GelRed 10,000×水溶液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
3. 將凝膠小心地放入合適的容器中,緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,*染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5~10%聚丙烯酰胺的凝膠,染色時間通常介于30min到1h,并隨聚丙烯酰胺含量增加而延長。
注意事項
1) 用泡染法染色時,染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用3次左右。
2) 3× GelRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
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