脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒真的特別好用

上海信帆生物供應(yīng)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒，該產(chǎn)品是我司明星產(chǎn)品，深受廣大科研用戶青睞，質(zhì)量穩(wěn)定，大家可隨時咨詢！

脫氧雪腐鐮刀菌烯醇酶免檢測試劑盒，試劑盒采用固相酶聯(lián)免疫間接競爭法測定脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON，又稱嘔吐毒素），適用于玉米、大麥、小麥等谷物及其制品，飼料及其原料中玉米赤霉烯酮的快速篩查，分析時間小于1小時。

【適用范圍】 本試劑盒可定性、定量檢測小麥、面粉等谷物及其加工制 品和飼料中的嘔吐毒素

【樣本前處理步驟】

一、面粉、小麥等谷物及其加工制品（稀釋倍數(shù)：10） 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品，加入 25mL 去離子水，混勻； 2. 充分振蕩 15min 后過濾或 4000rpm 離心 5-10min； 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 樣品稀釋液（試劑盒中 提供），充分混勻后即為待測樣液； 4. 移取該液 50uL 進行檢測。

二、麩皮、豆粕等（稀釋倍數(shù)：10） 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品，加入 25mL 去離子水，混勻； 2. 充分振蕩 15min 后過濾或 4000rpm 離心 5-10min； 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 去離子水，充分混勻后 即為待測樣液； 4. 移取該液 50uL 進行檢測。

三、玉米粉、雞料、鴨料、豬料等（稀釋倍數(shù)：10） 1. 取 5.0g 粉碎好的樣品，加入 25mL 去離子水，混勻； 2. 充分振蕩 15min 后過濾或 4000rpm 離心 5-10min； 3. 取 500μL 濾液或上清液加 500μL 20%甲醇-水，充分混勻 后即為待測樣液； 4. 稀釋后的待測樣液需 pH 值約 7.0 左右，移取該液 50uL 進 行檢測。

注意事項：

1. 試劑及樣本沒有恢復到室溫（20~25℃）會導致所有標準 的 OD 值偏低。

2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標準 曲線不成線性，重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng) 立即進行下一步操作。

3. 每種試劑使用前均需搖勻。

4. 反應(yīng)終止液為 2M 硫酸，避免接觸皮膚。

5. 不要使用過了有效期的試劑盒；也不要摻雜使用過了有 效期的試劑盒；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

6. 儲存條件：試劑盒保存于 2~8℃，不能冷凍，將不用的 微孔板重新真空密封。標準物質(zhì)和無色的顯色劑對光敏 感，因此要避光保存。 7. 試劑變質(zhì)的跡象：顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì)， 應(yīng)當棄之。0 標準的吸光度（450/630nm）值小于 0.5 （A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質(zhì)。

8. 對玻璃器皿和DON溶液消毒好用次氯酸鈉（10%，v/v） 溶液浸泡過夜。

9. 該試劑盒采用室溫反應(yīng)（20~25℃），當反應(yīng)溫度高于 25℃或者低于 20℃時，均需相應(yīng)縮短或延長反應(yīng)時間， 具體可咨詢

【概要】

嘔吐毒素(Vomitoxin)，化學上稱作脫氧腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)，屬于霉菌的單端孢菌素族，具有很高的細胞毒性及免疫抑制性質(zhì)，是由幾種粉色鐮刀霉真菌屬產(chǎn)生的。玉米中容易產(chǎn)生這種毒素。嘔吐毒素在小麥、玉米以及稻米中的含量通常是mg/kg級。DON屬于劇毒或中等毒物，人畜攝入了被DON污染的食物／飼料后，會導致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀，嚴重時損害造血系統(tǒng)造成死亡。研究表明，DON可能對免疫系統(tǒng)有影響，有明顯胚胎毒性和一定致畸作用，可能有遺傳毒性，但無致癌、致突變作用。谷物及飼料中DON的含量有嚴格的*。我國谷物中DON 的*為1.0 mg／kg 。HPLC或GC-MS用作檢測嘔吐毒素的方法，但是其前處理步驟繁瑣，費用昂貴。酶聯(lián)免疫檢測試劑盒則可經(jīng)濟、快速地檢測嘔吐毒素。

【試驗原理】

  嘔吐毒素檢測試劑盒又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇檢測試劑盒，本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在酶標板微孔條上預包被嘔吐毒素抗原，樣本中嘔吐毒素和此抗原競爭結(jié)合抗嘔吐毒素抗體（抗試劑），同時抗嘔吐毒素抗體與酶標二抗（酶標物）相結(jié)合，經(jīng)TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含嘔吐毒素的含量成負相關(guān)，對照標準曲線，再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中嘔吐毒素的含量。

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