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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1 mL |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 11208ES03 | 應用領域 | 生物產業 |
| 主要用途 | 本產品可用于基因分型和基因多重定量分析。 |
產品介紹
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix | 11208ES03 | 1 mL | 1365.00 |
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix | 11208ES08 | 5 mL | 5565.00 |
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix | 11208ES60 | 20×5 mL | 91265.00 |
產品描述
本產品是2×Mix預混合試劑，能夠實現在單個反應孔中進行多重熒光定量PCR。本產品含有基因改造的熱啟動Taq酶，極大地提高了擴增靈敏度和特異性，本產品對多重反應緩沖體系進行了深度優化，能夠提高反應的擴增效率，促進低濃度模板的有效擴增。本產品可用于基因分型和基因多重定量分析。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 | |
11208ES03（1 mL） | 11208ES08（5 mL） | ||
11208-A | 2×Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix | 1 mL | 1 mL × 5 |
11208-B | 50×Low Rox | 40 μL | 200 μL |
11208-C | 50×High Rox | 40 μL | 200 μL |
運輸與保存方式
冰袋運輸，-20℃儲存；有效期18個月。
反應體系
反應組分 | 體積（μL） | 終濃度 |
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix | 10 | 1× |
Primer Mix | x | 0.1-1 μM |
TaqMan Probe Mix | y | 50 nM-300 nM |
50×High or Low Rox | 0.4 | 1× |
模板DNA/cDNA | 1-100 ng | - |
ddH2O | up to 20 | - |
【注】：1）上表中模板量和引物濃度以及探針濃度均為推薦量，可根據具體實驗情況進行調整，選擇適投入量和濃度；
2）一般情況下，每條引物濃度為0.2 μM即可得到較好的擴增效果，引物濃度可在0.1-1 μM的范圍內進行調節；
3）反應體系可根據實驗需求進行等比例調節，模板體積不超過總體積的1/10。
擴增程序
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
變性 | 95℃ | 5 s | 40 |
退火/延伸 | 60℃ | 30 s |
【注】：
1）某些情況下，可通過調節退火延伸時間提高多重qPCR反應的性能。
2）反應結束后可通過瓊脂糖凝膠電泳確認產物的特異性。
注意事項
一、關于操作
1）請于使用前確保產品*解凍并*混勻，短暫離心收集至管底后置于冰上備用。
2）為避免樣品間交叉污染和氣溶膠污染，推薦在超凈臺中進行反應體系的配制。
3）使用過程中避免產品的反復凍融。
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
二、實驗方法
a：引物設計
1. 引物必須具有特異性。
2. 引物的Tm值必須在58-60℃，而且各組引物的Tm差異應控制在1-2℃。
3. 引物的長度一般控制在15-30 bp之間。
b：探針設計
1. TaqMan探針的Tm值要比對應的引物高約10℃（68-70℃）。
2. TaqMan探針和引物間不能形成二聚體。
實驗案例
檢測HEK293T細胞A1、A2、A3、A4基因10倍梯度濃度擴增。
一、反應體系配制
反應組分 | 體積（μL） | 終濃度 |
Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix | 10 | 1× |
Primer Mix | 0.5 | 250 nM |
TaqMan Probe Mix | 0.5 | 250 nM |
50×High or Low Rox | 0.4 | 1× |
HEK293T細胞基因組 | 0.2 ng~200 ng | - |
ddH2O | up to 20 | - |
二、擴增程序
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三、實驗結果
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HB190829
