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產品簡介
產品介紹
產品名稱: LysoTracker Green DND-26 溶酶體綠色熒光探針
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
LysoTracker Green DND-26 溶酶體綠色熒光探針 | 40738ES50 | 50µl | -20℃避光保存 | 359.00 |
產品描述
LysoTracker®系列探針是對活細胞中的酸性區室進行選擇性染色的一類熒光染料，該類探針具有幾大重要的特點，1）選擇性標記酸性細胞器；2）納摩爾級（nM）濃度即可有效標記活細胞；3）具有多色探針提供，可根據情況對樣品進行多標實驗。LysoTracker®結構上由一個熒光基團和相連的弱堿基構成，可自由穿過細胞膜，一般聚集在球形細胞器上，適用于觀察溶酶體內部生物合成及相關發病機理。Lysotracker中性pH下僅僅發生部分質子化，因此該探針標記細胞器的原理可能與其*質子化并滯留在細胞器膜上有關。
本品LysoTracker® Green DND-26為綠色熒光標記的溶酶體探針，具有504/511nm的zui大激發/發射波長。本品以溶于無水DMSO的1mM儲存液形式提供。
產品性質
CAS號（CAS NO.） | N/A |
分子式（Formula） | C18H26BClF2N4O |
分子量（Molecular Weight） | 398.6894 |
Ex/Em（nm） | 504/511 |
外觀（Appearance） | 黃色溶液 |
結構式（Structure） |  |
運輸和保存方法
室溫運輸。-20℃避光保存，避免反復凍融。
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對其進行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。*工作濃度需根據不同的實驗要求、細胞類型、細胞或組織的膜通透性等進行優化。
1.工作液的配制
利用培養基或合適的緩沖液將1mM 儲存液稀釋至工作濃度，推薦工作液濃度為50-75nM；
【注意】：1）為了降低探針加載過度可能引起的假陽性，建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。2）若細胞在染色后于不含染料的培養基中孵育，會觀察到熒光信號的衰減和細胞的空泡化現象。
2.染色
2.1 對于貼壁細胞
1）將細胞置于培養皿中的蓋玻片上，加入合適培養基，使其爬片生長。
2）待細胞生長到合適豐度，吸除培養液，加入適量37℃預熱的含探針工作液。于生長狀態下孵育30min～2h（具體孵育時間需根據細胞類型而定）。【注意】：對Lysotracker Green DND-26內化過程的動力學研究表明，活細胞攝取此染料僅需數秒即可。缺點在于此探針可能引起溶酶體產生“堿性效應Alkalizing effect”，也就是說過長孵育時間會誘導溶酶體pH值提高。建議僅當該探針于37℃孵育細胞1-5min才可用作pH指示劑。
3）利用新鮮培養基替換上述染色液并在熒光顯微鏡（含合適濾片）下觀察。若染色不夠充分，建議增加染料濃度或延長染色時間。
2.2 對于懸浮細胞
1）離心，吸除上清。
2）利用37℃預熱的探針工作液重懸細胞，于生長狀態下孵育30min～2h（具體時間需根據細胞類型而定）。
3）離心，吸除染色液，加入新鮮培養液重懸細胞。
4）置于熒光鏡下觀察。若染色不夠充分，建議增加染料濃度或加長染色時間。
【注意】：對于懸浮細胞，也可將細胞貼附于經BD Cell-Tak處理過的蓋玻片上，然后使用類似于貼壁細胞的方法進行染色。
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